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大鼠胰岛素瘤细胞INS-1

大鼠胰岛素瘤细胞INS-1,,结构式
大鼠胰岛素瘤细胞INS-1
  • CAS号:
  • 英文名:Rat insulinoma cell INS-1
  • 中文名:大鼠胰岛素瘤细胞INS-1
  • CBNumber:CB35539836
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

大鼠胰岛素瘤细胞INS-1性质、用途与生产工艺

  • 描述 大鼠胰岛素瘤细胞INS-1源自X射线照射的移植胰岛瘤的大鼠,胰岛素阳性,可合成胰岛素原I和II,可用于beta细胞功能研究。

    大鼠胰岛素瘤细胞INS-1

  • 培养步骤 培养基及培养冻存条件准备:

    准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%,添加50μmol/Lβ-巯基乙醇。

    培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

    细胞处理:

    复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

    细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

    弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

    按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

    将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

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