蜡质芽孢杆菌的应用

概述^[1]

蜡质芽孢杆菌是一种在土壤中分离得到的微生物，通过研究发现，不仅能促进番茄、黄瓜、辣椒，水稻，香蕉等作物的生长，还对番茄青枯病、黄瓜根结线虫病等多种土传病害具有较好的防效，还可以防治水稻纹枯病，其可以防治蔬菜的根结线虫，山东泰诺药业有限公司与新沂中凯农用化工有限公司已经申请了农药登记，用于防治姜瘟病，青枯病，枯萎病等。

应用^[2-4]

蜡质芽孢杆菌是一种微生物农药，通过定殖、转移和拮抗作用，在植物表面大量繁殖，成为植物位点和空间微环境的有力竞争者，这样直接阻挠和干扰外来有害病原菌的定殖和生长。

1）蜡质芽孢杆菌(Bacillus-cereus)在处理制革废水COD中的应用，利用蜡质芽孢杆菌处理制革废水COD包括以下步骤：(l)培养基配制；(2)发酵：将蜡质芽孢杆菌菌种接种至装有培养基的摇瓶，进行发酵得发酵液；(3)生物絮凝剂的提取：发酵液经离心、萃取、再离心、真空冷冻干燥得生物絮凝剂产品；(4)废水处理：将生物絮凝剂加入装有制革废水的烧杯中，于磁力搅拌器上进行搅拌处理。本发明用新的生物絮凝剂处理制革废水中的COD，去除效率可达到75.6%，发挥生物絮凝剂绿色环保、不产生二次污染等独特性能，为去除制革废水中的高浓度COD提供了新方法，拓宽了对蜡质芽孢杆菌功能方面的应用，具有较强的应用价值。

2）含蜡质芽孢杆菌的杀菌组合物在水稻立枯病的应用。所述的杀菌组合物有效成分由烯丙苯噻唑和蜡质芽孢杆菌组成，设定含量为90亿个活芽孢/克蜡质芽孢杆菌母药为90％原药，烯丙苯噻唑和蜡质芽孢杆菌的重量比为2：1～1：8。本发明将烯丙苯噻唑和蜡质芽孢杆菌按照特定的重量比进行复配，具有明显的协同增效作用，能够显著提高药效，降低农药成本，有利于病菌的综合治理。

蜡质芽孢杆菌发酵液的制备^[1]

取出菌种保藏管（菌种分离自山东泰诺药业有限公司蜡质芽孢杆菌中），用LB固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种至50毫升LB培养基中，在培养箱中30℃震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至5L大三角瓶中的芽孢杆菌液体培养基，装液量为2L，30℃震荡培养24小时，检测其菌液浓度，菌液含量为31亿/毫升，即可作为蜡质芽孢杆菌种子液。将蜡质芽孢杆菌种子液接种至1000L的发酵罐中，装液量为600L的发酵培养基，通气量为前16小时为每分钟液气比为1：0.6，其后通气量为1：1；开搅拌，转速为160r/min，培养温度前24小时为30℃，其后，每4小时将温度提高1℃，培养34小时，检测其芽孢含量为110亿CFU/ml，结束发酵，作为蜡质芽孢杆菌发酵液；

其中所述LB培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.2，固体培养基中加入琼脂2%。其中所述蜡质芽孢杆菌液体培养基：葡萄糖10g/L，可溶性淀粉8g/L，黄豆粉15g/L，鱼粉5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.5g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，氯化钙0.5g/L，pH7.2；

其中所述的发酵培养基：葡萄糖10g/L，玉米粉20g/L，豆粕粉78g/L，鱼粉5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.5g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，氯化钙0.5g/L，pH7.2；

各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟；

主要参考资料

[1] CN201510951095.X一种蜡质芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法

[2] CN201711334798.3含蜡质芽孢杆菌的杀菌组合物在水稻立枯病的应用

[3] CN201510090593.X一种蜡质芽孢杆菌在处理制革废水COD中的应用

[4] CN201711334798.3含蜡质芽孢杆菌的杀菌组合物在水稻立枯病的应用