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白葡萄球菌粉的应用与制备

发布日期:2020/10/21 8:45:43

概述[1]

白葡萄球菌粉为一种非致病性的口服细菌制剂,系由非致病性白葡萄球菌液体培养而得的灭活干燥菌体制成。实验表明,其具有近似可待因的镇咳强度,直接作用于延脑咳嗽中枢,对急性咳嗽镇咳作用明显,剂量越大,镇咳作用越强,并有调节自主神经系统功能,能使痰量明显减少。

应用[2]

白葡萄球菌粉为一种非致病性的口服细菌制剂,系由非致病性白葡萄球菌液体培养而得的灭活干燥菌体制成。实验表明,其具有近似可待因的镇咳强度,直接作用于延脑咳嗽中枢,对急性咳嗽镇咳作用明显,剂量越大,镇咳作用越强,并有调节自主神经系统功能,能使痰量明显减少。

制备[1,3]

方法1:白葡萄球菌粉按照如下工艺制备而得:

1)取白葡萄球菌液(5×107CFU/mL),按照3%的接种量接种到种子培养基中,30℃、100rpm摇床培养18h,获得种子液;所述种子培养基的组分为:葡萄糖12g/L,琼脂7g/L,蛋白胨3g/L,KH2PO40.5g/L,K2HPO40.5g/L,MgSO40.1g/L,FeSO40.1g/L,pH7.5;

2)将种子液按照5%的接种量接种于装有50L麦麸培养基的发酵罐中进行发酵培养,培养温度30℃,通气量保持溶氧水平为20%,并通过添加葡萄糖控制含糖量不低于0.2wt%,发酵培养54h,得白葡萄球菌发酵液。

3)往白葡萄球菌发酵液中添加甲醛,控制终浓度为0.5wt%,25℃灭活48h,再通过高速碟片机以5000rpm的速度离心8min,收集菌体沉淀,真空冷冻干燥,即得。

方法2:一种白葡萄球菌粉的制备工艺,其包括如下步骤:

1)取白葡萄球菌液(3×107CFU/mL),按照5%的接种量接种到种子培养基中,30℃、150r/min摇床培养24h,获得种子液;所述种子培养基的组分为:葡萄糖10g/L,琼脂5g/L,蛋白胨3g/L,KH2PO40.5g/L,K2HPO40.5g/L,MgSO40.1g/L,FeSO40.1g/L,pH7.5;

2)将种子液按照6%的接种量接种于装有10L发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养,培养温度30℃,通气量保持溶氧水平为20%,并通过添加葡萄糖控制糖含量不低于0.2wt%,发酵培养48h,得发酵液;所述发酵培养基按照如下工艺制备而得:(1)将麦麸研磨粉碎,过100目筛,然后以1:20的料水质量比混合,再加入中性淀粉酶,添加量为0.5U/g麦麸,在65℃温度条件下处理15min,然后离心,收集沉淀和上层液体,将上层液体置于95℃的条件下,保温10min灭酶,冷却至室温,得到组分A;(2)将沉淀加入到5倍重量的浓度为3M的盐酸,在80℃搅拌水解9小时,搅拌速度为100rpm,过滤收集滤液,然后用氨水中和残余盐酸,调整溶液pH为7.5,得到组分B;(3)将组分A和组分B混匀得到发酵培养基;

3)往发酵液中添加甲醛,控制终浓度为0.5wt%,25℃灭活48h,再通过高速碟片机以4000rpm的速度离心10min,收集菌体沉淀,真空冷冻干燥,即得。

主要参考资料

[1] CN201810072108.X白葡萄球菌粉及其应用

[2]  CN201810072107.5白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法

[3] CN201810119399.3一种白葡萄球菌粉的制备工艺

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