ACK红细胞裂解液(ACK LYSIS BUFFER)注意事项

ACK红细胞裂解液(ACK LYSIS BUFFER)概述^[1]

ACK红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer) ,也称为ACK Lysis Buffer ,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,主要有效成分为氯化铵, ACK Lysis Buffer经过优化方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。

ACK Lysis Buffe对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞,效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。本裂解液经过滤除菌,经过ACK Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

ACK红细胞裂解液注意事项^[1]

1、制备细胞悬液是应根据具体实验需要,不-定要制备成单细胞悬液。

2、后续试验如果是用于细胞培养, 操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。

3、离心步骤尽量在4°C离心机上操作。

4、对于常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管; 快速步骤少了- -次离心过程，洗涤效果略差- -些 ,同时需要大体积的离心管。

5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。

6、如果经过ACK Lysis Buffe处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液，即无需在该操作中特意去除RNase。

7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

主要参考文献

[1] 张卫东  章方彪  史宏灿  谭荣邦  叶钢  李广宇  潘枢  孙飞；红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞； 《中国组织工程研究》 2013年49期。