造血干细胞抗原CD133

背景^[1-3]

造血干细胞抗原CD133是造血干细胞表面的糖蛋白，是调控干细胞命运的关键分子,是干细胞的功能性标志物。一般认为，VEGFR2（血管内皮生长因子受体2）是HSCs（造血干细胞）的特异性的表面标志。近来经研究发现CD133分子是HSCs（造血干细胞）特异性标志。CD133即AC133，是一个新发现的HSCs（造血干细胞）表面标志，在HSCs（造血干细胞）分化成熟过程中，CD133的含量迅速降低。EPCs(血管内皮前体细胞)区别于成熟内皮细胞的主要标志是CD133。

经研究发现内皮细胞不能结合CD133的抗体。证实分化成熟的内皮细胞不具有CD133。这些说明CD133可以作为EPCs(血管内皮前体细胞)区别于成熟内皮细胞的一个表面标志。

抗原抗体结合特点

1）特异性：抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能；

2）可逆性：是指Ag与相应Ab结合成IC后，在一定条件下可解离为游离抗原与抗体。

3）阶段性：

一阶段：特异性结合阶段（①反应速度快，几秒钟或几分钟即可完成②不出现肉眼可见反应）；

第二阶段：可见阶段（表现为凝集、沉淀、补体结合等反应①反应进行慢，需要几分钟、几十分钟或更长②受电解质、温度、酸碱度等多种因素影响）。

4）比例性：（最适比或等价点）是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见反应。

应用^[4][5]

用于人前列腺间充质干细胞的生物学特性及其多分化潜能研究

通过从以下各种分选方式得到的人前列腺间充质单核细胞亚群,贴壁粘附法人前列腺间充质单核细胞亚群,免疫磁珠阳性分选单一抗原CD105,CD133和CD271人前列腺间充质单核细胞亚群各自分别建立起单一纯化的人前列腺hPMSCs,同时摸索出其标准的体外培养条件。

通过实验证实CD133和CD271单克隆阳性分选的hPMSCs可以作为理想的前列腺疾病研究临床和科研的种子细胞,表面抗原CD133和CD271也就是分离人前列腺间充质干细胞最有效率的表面标志物。

获取的前列腺组织标本经过Percoll液（d=1.073g/m1）提取出了hPMNCs细胞混悬液之后并培养扩增到代之后,hPMNCs被分成了3份（3/5,1/5和1/5）,其中的3/5本研究平均的分成了3份,这3份前列腺单核细胞本研究分别用CD105、CD133和CD271单克隆抗体阳性免疫磁珠进行分选,而其余的一个1/5本研究直接用粘附贴壁法分选出了PA前列腺单核细胞亚群,另一个1/5本研究直接将它培养到第三代作为对照细胞株。

通过以上的处理本研究分别获得了5个亚群的细胞,之后本研究将分选出的各细胞亚群接种在T75培养瓶内,给予完全培养基CCM（Complete Culture Medium）培养到第三代（P3）。

为了保持对照实验结果评估的一致性,本研究将所有五个前列腺间充质干细胞分选亚群（前列腺单核细胞亚群,PA前列腺单核细胞亚群以及单克隆抗体阳性CD105、CD133和CD271阳性亚群）在体外培养到第三代（P3）。

通过不同的分选流程得到了可稳定传代的以下五个细胞亚群：贴壁粘附法人前列腺间充质单核细胞亚群,免疫磁珠分选单一抗原CD105,CD133和CD271和人前列腺间充质单核细胞亚群并分别对它们的生物特性进行了系统性的研究,并同时探讨了它们在体外向内胚层成骨细胞以及脂肪细胞和外胚层神经细胞分化的潜能（通过比较各亚群茜素红S和油红0染色能力以及免疫荧光照相和PCR分析）。

参考文献

[1]Mesenchymal stem cells,cancer challenges and new directions[J].Nedime Serakinci,Umut Fahrioglu,Rikke Christensen.European Journal of Cancer.2014

[2]Multilineage potential and proteomic profiling of human dental stem cells derived from a single donor[J].Rajreddy Patil,B.Mohana Kumar,Won-Jae Lee,Ryoung-Hoon Jeon,Si-Jung Jang,Yeon-Mi Lee,Bong-Wook Park,June-Ho Byun,Chun-Seob Ahn,Jae-Won Kim,Gyu-Jin Rho.Experimental Cell Research.2014(1)

[3]Identification of Specific Cell-Surface Markers of Adipose-Derived Stem Cells from Subcutaneous and Visceral Fat Depots[J].Wee Kiat Ong,Chuen Seng Tan,Kai Li Chan,Grace Gandi Goesantoso,Xin Hui Derryn Chan,Edmund Chan,Jocelyn Yin,Chia Rou Yeo,Chin Meng Khoo,Jimmy Bok Yan So,Asim Shabbir,Sue-Anne Toh,Weiping Han,Shigeki Sugii.Stem Cell Reports.2014(2)

[4]Stable Genetic Alterations ofβ‐Catenin and ROR2 Regulate the Wnt Pathway,Affect the Fate of MSCs[J].Shi‐Xia Cai,Ai‐Ran Liu,Hong‐Li He,Qi‐Hong Chen,Yi Yang,Feng‐Mei Guo,Ying‐Zi Huang,Ling Liu,Hai‐Bo Qiu.J.Cell.Physiol..2014(6)

[5]卢泽平.人前列腺间充质干细胞的生物学特性及其多分化潜能研究[D].兰州大学,2014.