脱氧核苷酸钠的制备

【背景及概述】^[1][2]

20世纪70年代，从小牛胸腺中提取出来的DNA被成功水解成脱氧核苷酸，用作生化材料。1974年，由上海牛奶公司开办的上海长阳生化制药厂将脱氧核苷酸制成了稳定的钠盐。1994年，上海长阳生化制药厂生产的脱氧核苷酸钠片剂通过专家评审，被上海市科委列入年度科技推广项目。1998年，上海丽珠制药有限公司兼并上海长阳生化制药厂后开始直接从日本进鲑鱼提取DNA作为起始原料，将脱氧核苷酸钠片剂的活性成分含量从50％ 逐渐提高到95％ 以上，并使该片的质量标准从地方标准上升至国家标准，成为这种药物质量标准的起草单位。

2010年2-9月，国家食品药品监督管理局先后批准上海中西三维药业有限公司、上海丽珠制药有限公司、浙江国光生物制药有限公司、苏州新宝制药有限公司和江苏正大清江制药有限公司生产的脱氧核苷酸钠片剂上市，片剂规格为20 mg/片。2010年10月和2011年10月，国家食品药品监督管理局又分别批准了北京赛生药业有限公司(现为北京赛升药业股份有限公司)生产的脱氧核苷酸钠注射液和丽珠集团丽珠制药厂生产的注射用脱氧核苷酸钠上市，两注射剂规格均为50mg/支。

【适应症】^[3]

用于治疗各种原因引起的白细胞减少症。

【规格】^[3]

片剂：20mg；注射剂：50mg/2ml。

【用法用量】^[3]

成人：口服，20～40mg，tid；肌注50mg，qd。儿童：参照成人酌减。

【药理作用】^[1]

脱氧核苷酸钠为具有遗传特性的化学物质，与蛋白质结合后形成核蛋白，后者是生物体的基本物质。脱氧核苷酸钠在个体的生长、繁殖、遗传和变异等生理、生化功能方面起着重要作用，可通过核糖核酸控制蛋白质、尤其是某些关键性酶蛋白的合成，起协调体内一系列代谢的作用。因此，脱氧核苷酸钠有促进细胞生长、增强细胞活力的功能以及改变机体代谢的作用。

【不良反应】^[3]

经静脉滴注脱氧核苷酸钠的不良反应主要为滴注过程中出现的一过性头晕和低血压，减慢滴速后一般会获缓解；其他不良反应包括轻度的间断性发热、变态反应、过敏性休克和皮疹，对症处理、甚至无需处理都可得到缓解。

【注意事项】^[3]

1、当药品性状发生改变时禁止使用。

2、废弃药品包装不应随意丢弃。

【制备】^[2][4]

 一种高纯度混合脱氧核苷酸钠的制备方法，包括如下步骤：

(1) 将酶解液通过装有经再生处理的两根串联连接的阴离子交换树脂 1号柱和2号柱上样，使混合脱氧核苷酸钠被吸附在阴离子交换树脂上；所述的阴离子交换树脂为强碱性阴离子交换树脂，优选的为201×8、 711、717、HZ201、Dowex-1、Dowex-2或Amberlite-IRA-400；

(2) 然后用蒸馏水通入1号柱，洗至2号柱出口流出液的pH为7.0～ 9.0左右，再用酸通入1号柱，洗柱，洗至2号柱出口流出液的pH为3.0-3.5， 此时，即可将柱上各种脱氧核苷杂质洗尽；所述的酸为0.0001～0.001mol/L的盐酸、0.001～0.01mol/L的甲酸或 0.001～0.02mol/L的醋酸；

(3) 然后用氯化钠和酸的混合溶液通入1号柱，并将经过2号柱的流 出液全部通入装填有活性炭的3号柱吸附；所述的活性炭为型号为769或G15，可采用上海活性炭厂等市售的产 品；所述的氯化钠和酸的混合溶液为重量浓度为0.1～0.5％的氯化钠- 0.001～0.01mol/L甲酸的混合溶液、重量浓度为0.1～0.5％的氯化钠-0.001～ 0.02mol/L醋酸的混合溶液或重量浓度为0.1～0.5％-0.0001～0.001mol/L 盐酸的混合溶液；当1号柱出口流出液中，dGMP含量低于0.5g/L时，所述的氯化钠和 酸的混合溶液改用重量浓度为0.6～1％的氯化钠-0.001～0.02mol/L的甲酸的 混合溶液、重量浓度为0.6～1％的氯化钠-0.001～0.02醋酸的混合溶液或重 量浓度为0.6～1％的氯化钠-0.0001～0.001mol/L盐酸的混合溶液直接通入2 号柱进行洗脱，2号柱流出液全部上3号炭柱吸附，直至2号柱流出液中， 脱氧核苷酸的浓度浓度低于0.1～0.5g/L；此时dIMP、dXMP等脱氧核苷酸、蛋白质、色素等杂质大都吸附在1 号柱上；

(4) 用蒸馏水洗涤3号柱，水的体积用量为3号柱体积的3～5倍， 然后再用氨乙醇溶液洗脱，氨乙醇溶液的体积用量为3号柱体积的3～5倍， 收集氨乙醇溶液洗脱液中脱氧核苷酸钠浓度高于20g/L，且HPLC大于98％ (HPLC归一法)的部分，然后减压浓缩至混合脱氧核苷酸钠的重量浓度为 15～20％，超滤，冷冻干燥，得到成品脱氧核苷酸钠；

【主要参考资料】

[1] 陈勤奋. 脱氧核苷酸钠的临床应用[J]. 上海医药, 2014, 35(11): 11-14.

[2] 张小月, 接艳秀. 脱氧核苷酸钠临床研究综述[J]. 黑龙江科技信息, 2010, 8(4): 188.

[3] 临床用药速查手册

[4] 邱蔚然；曹静；邱志云高纯度混合脱氧核苷酸钠的制备方法. CN201010273743.8，申请日2010-09-06