蒙花苷的作用

背景^[1][2]

野菊花（Flower of Indian Dendranthema,Wild  chrysanthemum）为菊科多年生草本植物野菊的头状花序，外形与菊花相似。产品以色黄无梗、完整、气香、花未全开者为佳。野菊花可广泛用于治疗疔疮痈肿、咽喉肿痛、风火赤眼、头痛眩晕等病证。同时又有很好的降压作用，可用于高血压病的辅助治疗。

蒙花苷是野菊花的特征性化学成分，也是野菊花中活性最高的黄酮类成分，分子式为C₂₈H₃₂O₁₄，分子量为592.54，属于Flavonoids黄酮类，基于蒙花苷是野菊花的特征性化学成分，因此，如果能以蒙花苷作为该药材及其相关制剂的质量评价指标，既能较真实地反映其质量又具有专属性，可对野菊花药材及其制剂的质量控制起到重要作用。

目前有关于野菊花中蒙花苷提取方法主要涉及回流提取法、碱提醇沉法等方法，纯化方法主要涉及高效制备液相色谱法、大孔吸附树脂等方法。例如一种从野菊花中分离得到蒙花苷单体的方法，具体实验方案为：将野菊花药材用乙醇溶液回流提取，收集滤液，将滤液浓缩后静置析晶并烘干沉淀，将沉淀以甲醇进行超声波洗涤，过滤，收集过滤固体，烘干，经烘干后的固体中，加入有机溶剂溶解，过滤，收集滤液，经高效制备液相色谱分离，针对性收集蒙花苷单体的制备馏分溶液，得蒙花苷单体溶液，蒙花苷单体析出后经干燥得到蒙花苷单体产品。

该方法需经制备液相色谱分离，操作复杂，成本较高，很难进行大量制备。还有研究提供了一种从野菊花中分离得到蒙花苷单体的方法，该方法工艺复杂，需要加入酸碱，容易破坏化合物结构，需经大孔吸附树脂，费时费溶剂，且结晶收率低。就现有技术而言，还需对从野菊花中提取分离蒙花苷工艺进行改进，才能很好地满足实际生产需求。

结构

药理作用及应用 ^[3][4][5]

蒙花苷，其英文名为Linarin，属于黄酮类化合物。蒙花苷具有抗金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌、抗衰老作用、抗缺氧作用、抗不良刺激作用、对机体双向调节作用、抗疲劳作用、抑制血糖升高作用 、毒性及致突变性致畸方面的研究、对学习记忆影响作用。

蒙花苷具有非常广泛的生理和药理活性，对预防糖尿病和改善糖尿病有显著的作用还具有抑制磷酸二酯酶、醛糖还原酶、金黄色葡萄球菌、乙型溶血链球菌、抗菌等作用，能保护肝脏，并对慢性气管炎有一定疗效。如蒙花苷能降低高血糖小鼠血糖，同时可改善糖尿病小鼠的糖耐量、降低糖尿病小鼠血清丙二醛、总胆固醇及甘油三酯的含量，且无毒副作用，因此蒙花苷可用于糖尿病、高血脂相关的药物、食品或食品及药物组合物。

此外还可以利用蒙花苷制备其他化合物，如酶法水解蒙花苷制备金合欢素，金合欢素是野菊花中一种高活性的苷元成分，在野菊花中含量非常低，绝 大部分都以其糖苷形式存在，故从植物中直接抽提并不是有利的工业制备方法。蒙花苷是金合欢素的二糖苷，在野菊花、菊花、密蒙花等中草药中含量较高，两者区别在于金合欢素的C-7位上连接了一分子6-脱氧-α-L-吡喃鼠李糖基-(1 →6)-β-D-葡萄吡喃糖。

尽管目前通过水解蒙花苷制备金合欢素的案例较少，但是这也可能成为一种制备金合欢素的有效途径。方法包括制备粗酶液、 酶解和纯化步骤，具体为：1)粗酶液的制备：将纤维化纤维细菌接种于液体培养基中，30℃培养40h， 9000g离心10min后取上清，进行硫酸铵沉淀，收集20％-40％的组分，用缓冲液重新溶解即得；2)酶解：以蒙花苷为原料，利用溶解后的粗酶液对其转化，使7位的β-D- 葡萄糖苷键被水解得到金合欢素.

具体方法为：取蒙花苷置于反应瓶中，按照 10：1：2：0.1的体积比加入缓冲液、助溶剂、粗酶液与激活剂后共孵育；反应体系中蒙花苷浓度为0.1-0.5mM，缓冲液为20-50mM，助溶剂的浓度为2-10 mM，酶量为5-10mg/ml，激活剂浓度为2-20mM，pH值为5.0-11.0，反应温度 为20-40℃，反应时间为1-6h；3)金合欢素的制备：待反应结束后，将上述转化液与2倍体积的甲醇混合，加热至60度重复提取3-5次，收集提取液冷却结晶即得到金合欢素。

制备^[7][6]

方法1：一种从野菊花中提取蒙花苷的方法，包括以下步骤：步骤1：将野菊花粉碎并过三号筛后与硅藻土混合，野菊花和硅藻土的重量比为1:1；步骤2：采用ASE萃取法萃取蒙花苷，收集萃取液，其中，ASE萃取法所采用的萃取溶剂为甲醇.

步骤2包括以下子步骤：S1：在萃取池的底部垫3-6张滤纸，再加入硅藻土作为底层；S2：向萃取池中加入步骤1所得到的野菊花和硅藻土的混合物；S3：向萃取池中加入适量的硅藻土作为表层；S4：采用甲醇进行萃取；其中，萃取参数为：萃取温度100℃；循环次数2次；静态萃取时间10min；冲洗体积100％；吹扫时间60s；步骤3：将萃取液进行离心分离得到含有蒙花苷的上清液。

方法2：一种蒙花苷单体的分离纯化方法，包括如下工艺步骤：

1）提取：将野菊花药材粉碎成直径3mm的粗粉，按照药材重量:乙醇溶液体积=1Kg:10L计算，加入体积百分比为95%的乙醇溶液，回流提取3～4次，每次2小时，过滤，收集、合并滤液；经乙醇回流提取得到的提取液即滤液中主要含有蒙花苷、色素和极性类杂质成分。

2）浓缩：将步骤（1）收集、合并的滤液回收乙醇，浓缩至原滤液体积的10%，常温下静置析晶10～12小时，过滤收集沉淀，除去滤液，将沉淀60℃烘干后进行下一步洗涤处理；经浓缩后的滤液中主要含有色素和大分子极性类杂质成分。

3）溶剂洗涤：向步骤（2）经烘干后的沉淀中加入10倍量体积的甲醇进行超声波洗涤，待产品与甲醇成混悬液后用中速滤纸过滤，收集过滤固体，60℃烘干后待下一步处理；经洗涤后的滤液层主要含有色素和小极性类杂质。

4）溶解、过滤：将步骤（3）经烘干后的固体中，按照固体物质量:溶剂体积=1g:10mL，加入有机溶剂溶解，溶解后的溶液用有机膜过滤，滤除颗粒杂质，收集滤液；所述有机溶剂为吡啶、四氢呋喃或DMF。

5）高效制备液相色谱分离：取步骤（4）所得的滤液进样，用反相高效液相色谱法（RPHPLC）制备分离蒙花苷单体，紫外检测器在线监测，针对性收集蒙花苷单体的制备馏分溶液，得蒙花苷单体溶液；

主要参考资料

[1] CN201510029603.9 一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺

[2] 柴红玲, 吴林森, 金晓春. 野菊花天然活性成分蒙花苷的提取[J]. 湖北农业科学, 2011, 50(8): 1663-1665.

[3] CN201510029603.9 一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺

[4] CN201610989095.3 蒙花苷的医药保健用途 

[5] CN201510451784.4 一种酶法水解蒙花苷制备金合欢素的方法

[6]CN201510243008.5 从野菊花中提取蒙花苷的方法

[7] CN201210577503.6 一种蒙花苷单体的分离纯化方法