金丝桃苷的作用

背景及概述^[1][2]

金丝桃苷又名槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷，异名海棠因或田基黄苷，是一种重要的天然产物，属于黄酮醇苷类化合物，其结构为槲皮素-3-半乳糖苷。金丝桃苷广泛存在于多种植物体内，例如金丝桃科、桔梗科、小檗科、唇型科、杜鹃花科、蔷薇科等植物的果实及全草中，分布广泛，业内关注度高。临床上运用金丝桃苷的药物也有许多，大多为治疗心血管疾病的药物，除此之外金丝桃苷还具有抗肿瘤、抗衰老、抗抑郁、抗炎等多种作用，同时它还能够调节循环系统、免疫系统、消化系统、神经系统等。

金丝桃苷的各种药理作用中，其抗氧化应激损伤和抗细胞凋亡作用的研究一直是其研究的热点。金丝桃苷是一种黄酮苷类化合物，有文献报道了在氧化应激的情况下，黄酮类化合物通过促进细胞质中Nrf2 从Keap-1/Nrf2 复合物中解离出来，并促使解离的Nrf2 从细胞质进去细胞核中与AＲE 结合从而诱导Nrf2 编码的抗氧化应激损伤的蛋白酶的表达，清除机体的ＲOS，抵抗机体的氧化应激损伤。

结构

药理作用及应用^[1][2]

1. 金丝桃苷抗肝损伤作用

研究发现Hyp 具有减轻四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤作用，其机制可能通过提高大鼠肝组织中的抗氧化应激酶的活性。同时也有文献报道了Hyp 具有保护CCl4小鼠的急性肝损伤作用。体外实验研究也发现Hyp 具有以剂量依赖型的方式抵抗过氧化氢(H2O2) 诱导的人正常肝细胞L02 的损伤。Hyp 体内外抗急性肝损伤的研究提示，各种能引起急性肝损伤，如酗酒过度、误服具有引起肝损伤的药物等情况下，Hyp 可能成为其治疗的潜在药物。

2. 金丝桃苷抗抑郁作用

随着学习、工作和社会的压力越来越大，现代生活的人们产生抑郁的情况也随之增加，而人们产生抑郁症状的病理生理基础大多与中枢神经系统所调控的神经因子相关。

有文献报道Hyp 能改善皮质酮诱导PC12 神经细胞的神经毒性损伤，其机理可能是减少神经细胞内的钙超负荷( calcium overload) 内流，并通过AC-cAMP-CＲEB 信号通路，提高脑源性神经营养因子(BDNF) 和cAMP 反应原件结合蛋白( cAMP response-binding protein) ，从而达到抗抑郁的作用。研究发现Hyp 具有激活多巴胺受体介导的中枢神经系统，降低小鼠在被迫游泳中的静止不动时间。

3 .金丝桃苷抗炎症与抗血栓作用

有文献报道Hyp 具有抑制高糖诱导人静脉内皮细胞和小鼠血管炎症的发生，提示Hyp 是糖尿病和高血压的潜在有效治疗药物。Hyp 也通过抑制NF-κB 的活化产生抗炎作用。K研究发现Hyp 具有抗血栓作用，机理是通过抑制人脐静脉内细胞中的凝血酶和活化因子Fxa。同时也有文献报道Hyp 具有抗血小板凝聚活性。

4 .金丝桃苷抗癌与抗菌作用

研究发现Hyp 能诱导骨肉癌细胞停滞在G0 /G1周期，从而抑制骨肉癌细胞的分化，但不会引起细胞的明显凋亡。肉癌细胞迁移实验也证实了Hyp能抑制肉癌细胞的潜在转移性。Hyp 与槲皮素联合应用能通过下调microＲNA-27a 的表达从而抑制肾肿癌细胞。有文献报道分别从黄蜀葵和喜术中提取的金丝桃苷具有体内外抗乙肝病毒和抗菌作用。

5 .金丝桃苷抗氧化应激与抗细胞凋亡作用

在Hyp 的多种活性研究中，近年来其抗氧化应激损伤，抗细胞凋亡的研究越来越受到研究者的重视。Hyp 能减轻H2O2引起的人脐静脉内皮细胞的氧化应激损伤。研究发现Hyp 能提高过氧化氢酶( catalase，CAT)，谷胱甘肽过氧化物酶( glutathioneperoxidase，GPx) 活性，从而清除细胞内的氧自由基( oxygen free radical，ＲOS) ，防止氧化应激产生的细胞内DNA 破碎残片，从而保护肺成纤维细胞抵抗H2O2引起的氧化应激。

有文献报道Hyp 具有保护神经细胞PC12 抵抗H2O2和叔丁基过氧化氢( t-BuOH ) 引起的氧化应激损伤。Hyp 不仅具有抗氧化应激损伤作用，而且也具有抗细胞凋亡作用

作用机制^[1][2]

1）细胞外信号调解激酶1 /2 途径

细胞外信号调节激酶( extracellular signal-regulatedkinase，EＲK) 是丝裂原活化蛋白激酶( mitogen activatedprotein kinase，MAPK) 的家族成员之一，EＲK l /2 信号通路是经典的EＲK 信号转导途径研究发现Hyp 能激活EＲK 1 /2，从而保护缺血再灌注引起的心脏损伤。该研究也发现了提高EＲK 1 /2 的磷酸化水平抵抗H2O2引起的人脐静脉内皮细胞的氧化应激损伤。

2）细胞内钙信号途径

正常细胞内外的钙离子浓度具有一定的生理范围，一旦细胞内外的钙离子浓度发生变化，则钙离子可通过3 个方面进行钙信号的传导。方面钙离子可通过钙结合蛋白调节，第二方面钙离子直接调节钙调磷脂酶等活性，第三方面钙离子可以作用于Na+、Cl－、K+等离子通道进行调节。研究发现Hyp 能降低十四酰佛波乙酸酯刺激后人肥大细胞株中HMC-1 细胞内游离钙离子，从而降低细胞内胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP) mＲNA 水平，同时也降低了白介素-1β(IL-1β) 和白介素6( interleukin-6， IL-6) 的mＲNA 水平，并且通过抑制NF-κB 的核转位和IκBα 的降解，从而达到抗过敏作用。

3）磷酸-3-激酶/AKT 途径

磷脂酰肌醇-3-激酶( PI3K) 蛋白家族参与细胞存活、生长、代谢等多种细胞功能的调控。AKT，亦称为蛋白激酶B( PKB) ，是PI3K 下游主要的效应物。PI3K激活的结果是在质膜上产生第二信使PIP3，PIP3与细胞内含有PH 结构域的信号蛋白AKT 和PDK-1结合，促使PDK-1磷酸化AKT 蛋白的Ser308 导致AKT 活化。活化AKT通过磷酸化多种酶、激酶和转录因子等下游因子，进而调节细胞的功能。

4）核因子NF-E2 相关因子-2-抗氧化还原元件途径

近年研究发现，Nrf2-AＲE 抗氧化途径是机体抵抗由于外界产生的化学和环境导致的氧化应激的重要途径之一。Nrf2 属于亮氨酸拉链转录因子家族，是一个能调控一系列编码解毒酶，药物转运体、抗凋亡蛋白等基因的共诱导和表达的核转录因子。Nrf2 在人体的各个器官中普遍存在，是机体重要的抵抗氧化应激重要途径之一。

制备^[4-5]

方法1：金丝桃苷采用如下的提取方法获得：取山香圆叶或贯叶金丝桃，加5～15 倍量的30％～90％乙醇回流提取1～3次，每次回流提取1～3小时，滤过；合并滤液，回收乙醇，水溶液通过大孔吸附树脂柱洗脱，收集洗脱部分，减压浓缩，干燥，得金丝桃苷的混合总苷，经分离，合并金丝桃苷流份，结晶，得到金丝桃苷:纯品。

方法2：罗布麻叶中金丝桃苷的制备方法，具体包括以下步骤：

1)取罗布麻叶药材拣选、洗净、干燥后放入提取罐中，加5~10倍量的亲水性溶剂，加热回流1~3次，过滤、合并提取液，浓缩，得罗布麻叶提取液，备用；

2)取步骤(1)得到的罗布麻叶提取液加入乙醇使乙醇的浓度达到75%~85%，静置、沉淀，滤出溶液，浓缩，得罗布麻叶提取液的醇沉液待用；

3)取步骤(2)得到的罗布麻叶醇沉液上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为50%~70%的乙醇洗脱，薄层色谱检识、收集50%~70%乙醇洗脱液、浓缩，得到罗布麻叶中金丝桃苷的粗提物，备用；

4)取步骤(3)得到的金丝桃苷粗提物用乙酸乙酯或正丁醇萃取，得萃取液，浓缩得到萃取物，然后加入亲水性溶剂，加热回流提取3~5次，每次1~2小时，趁热过滤，滤液减压浓缩，4℃冷藏结晶，以亲水性溶剂洗涤，干燥，即得纯度为90%~96%的金丝桃苷。

主要参考资料

[1] 金丝桃苷药理作用及其作用机制的研究进展

[2] 金丝桃苷的药理作用机制研究进展

[3] CN201010253791.0 金丝桃苷的提取方法及其制备药物的用途

[4] CN201110075635.4 罗布麻叶中金丝桃苷的制备方法