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嘌呤霉素的相关研究

发布日期:2020/3/25 7:56:49

背景及概述[1][2]

嘌呤霉素是由产生嘌呤霉素的放线菌发酵液中提得的一种抗菌素。无色晶体,熔点175—177℃,水溶液对石蕊呈碱性。对革兰氏阳性和阴性细胞以及锥虫、阿米巴原虫和肿瘤细胞等都有抑制作用。嘌呤霉素主治阿米巴感染,也可治疗某些肿瘤病。

相关研究[2-5]

嘌呤霉素可引起足细胞损伤,机制还不是非常清楚,有研究认为嘌呤霉素可能是通过引起足细胞氧化应激损伤,导致足细胞内氧化还原系统紊乱,超氧化物增加。不过嘌呤霉素仍常常被用来构建肾病大鼠模型,该模型是研究微小病变型肾病(MCNS)和局灶节段性肾小球硬化的理想动物模型l。但是目前尚未见到利用嘌呤霉素体外构建足细胞损伤的模型,特别是利用该模型研究足细胞相关蛋白尿发生的分子机制的报道,而且由于研究目的不同,所用嘌呤霉素的剂量和处理时间也不尽相同。有研究发现45mg/L嘌呤霉素处理48h后,足细胞发生了明显凋亡,而与75mg/L嘌呤霉素相比,尽管处理时间延长了,但是嘌呤霉素的使用剂量减少了近一半,比较经济;同时利用MTT实验检测了45mg/L嘌呤霉素处理48h后足细胞的活力情况,发现足细胞的活力也明显减弱,裂孔隔膜关键分子Nephrin和Podocin的表达发生明显改变,细胞骨架分布紊乱、解聚,因而体外建立嘌呤霉素致足细胞损伤的细胞模型时,使用45mg/L的嘌呤霉素处理小鼠足细胞48h是比较合适的选择。

有研究探讨雷公藤治疗足细胞病变的机制,利用嘌呤霉素诱导足细胞凋亡的体外损伤模型,观察雷公藤甲素对足细胞损伤的保护作用及其机制。方法用CCK法观察雷公藤甲素对足细胞增殖活性的影响;应用TUNEL染色法定性观察雷公藤甲素对嘌呤霉素诱导的足细胞凋亡的保护作用;采用PI染色后再经流式细胞仪来定量分析雷公藤甲素对足细胞凋亡的抑制效应。结果雷公藤甲素质量浓度小于1ng/mL时对足细胞生存率没有明显影响;100μg/mL嘌呤霉素诱导足细胞凋亡,但是此凋亡效应可以被1ng/mL雷公藤甲素抑制;而且这种抑制作用具有时间依赖性。结论雷公藤甲素通过抑制细胞凋亡来保护足细胞。雷公藤甲素对足细胞的保护作用可能是临床上雷公藤有效治疗足细胞病变的机制之一。

有研究检测槐杞黄颗粒对嘌呤霉素肾病大鼠尿蛋白及血清白蛋白水平的影响,探讨槐杞黄颗粒治疗肾病综合征的作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和槐杞黄组各20只,除对照组外,其余两组大鼠分别一次性腹腔注射嘌呤霉素15mg/100g,对照组和模型组分别用同等剂量蒸馏水和槐杞黄颗粒(2g/kg)灌胃,比较三组大鼠24h尿蛋白定量和血清白蛋白水平。结果:模型组和槐杞黄组24h尿蛋白定量高于对照组(P<0.05),第2天、第5天和第10天模型组24h尿蛋白定量较槐杞黄组增多(P<0.05),第15天和第20天模型组和槐杞黄组24h尿蛋白定量比较差异无统计学意义(P>0.05);血清白蛋白水平模型组和槐杞黄组较对照组低(P<0.05),槐杞黄组较模型组高,第2天模型组和槐杞黄组比较差异无统计学意义(P>0.05),其后时间点两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:槐杞黄颗粒可以减少肾病综合征大鼠蛋白尿的排出和提高嘌呤霉素肾病大鼠血清白蛋白水平。

有研究探讨丹参酮ⅡA对嘌呤霉素诱导肾足细胞骨架蛋白F-actin、synaptopodin损伤的作用及其可能的作用机制。方法:条件永生性人肾足细胞株AB8/13随机分为对照(control)组、嘌呤霉素氨基核苷(puromycinaminonucleoside,PAN)组、不同剂量(10,20,40,80μmol)丹参酮ⅡA干预(tanshinoneⅡA,TⅡA)组。采用细胞免疫荧光法检测各组细胞骨架蛋白F-actin、synaptopodin在足细胞内的分布及形态;通过DAPI染色法观察各组细胞核的变化;免疫印迹法检测各组细胞p-Rac1/Cdc42蛋白的表达量。结果:(1)F-actin、synaptopodin细胞免疫荧光染色:较control组,PAN组F-actin、synaptopodin结构紊乱,胞质回缩,细胞边缘褶皱,凋亡小体增多。各浓度TⅡA组上述情况较PAN组显著改善。(2)p-Rac1/Cdc42蛋白表达量,与对照组相比,PAN组p-Rac1/Cdc42蛋白表达量显著上调。与PAN组相比,TⅡA组p-Rac1/Cdc42蛋白表达量显著下调,且呈浓度依赖方式。结论:TⅡA可改善PAN诱导的足细胞骨架蛋白F-actin、synaptopodin的重排及结构紊乱,对足细胞具有一定保护作用,其机制可能与下调Rac1/Cdc42磷酸化水平,减少足细胞丝状伪足、层状伪足形成,从而稳定PAN诱导的细胞骨架变构有关。

主要参考资料

[1] 化工产品辞典

[2] 嘌呤霉素致足细胞损伤细胞模型的建立

[3] 雷公藤甲素对嘌呤霉素所致足细胞凋亡的抑制作用

[4] 槐杞黄颗粒对嘌呤霉素肾病大鼠尿蛋白和血清白蛋白水平的影响

[5] 丹参酮ⅡA对嘌呤霉素诱导肾足细胞损伤的保护作用

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