网站主页 2,6-二羟基嘌呤 新闻专题 黄嘌呤的检测方法

黄嘌呤的检测方法

发布日期:2020/4/9 8:01:47

背景及概述[1]

黄嘌呤亦称“2,6-二羟基嘌呤”,为鳞片状晶体(水)。微溶于醇,溶于水、无机酸、氨水及氢氧化钠溶液,存在于动物器官、酵母、番茄、咖啡豆及茶中。制法:可由鸟嘌呤硫酸溶液与亚硝酸钠反应而得。用途:作生化试剂。

检测方法[2-3]

王存等人以三聚氰胺为原料,采用热聚合法合成了类石墨烯状二维片状氮化碳(g-C3N4)纳米材料;通过电沉积和高电位氧化的方法制得氧化聚咪唑(PImox)/g-C3N4修饰电极(PImox/g-C3N4/GCE)。采用扫描电子显微镜(SEM)和X射线粉末衍射仪(XRD)对g-C3N4纳米材料进行了表征;通过循环伏安法(CV)和差分脉冲伏安法(DPV)考察了尿酸(UA)、黄嘌呤(XA)和次黄嘌呤(HX)在该电极上的电化学行为。结果表明,UA,XA和HX的检测线性范围分别为2. 0~216. 0,5. 0~542. 0和5. 0~778. 0μmol/L;检出限分别为0. 17,0. 30和0. 30μmol/L。将该修饰电极用于实际样品(血清和尿液)中UA,XA和HX的同时测定,加标回收率为98. 4%~105. 2%.

CN201811589035.8公开了一种用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极及其制备方法,以及采用该工作电极的酶生物传感器体系;本发明的工作电极的制备方法简单,且该工作电极与参比电极、对比电极以及电化学工作站组合构成的酶生物传感器体系,可以用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤,并且有着较高的精准性,不仅能够检测低浓度的底物,而且对于次黄嘌呤和黄嘌呤的浓度变化有着较高的灵敏性,且有较宽的检测范围,可以高效快速地获得次黄嘌呤和黄嘌呤的浓度检测结果,且具有很好的稳定性,可以重复使用,多次使用下仍能够保持对底物的灵敏检测。

实施例:用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的酶生物传感器的体系

通常的酶生物传感器体系包括电化学工作站和连接于电化学工作站的参比电极、对比电极和工作电极。

电化学工作站作为整个反应体系信号变化的监测器。本实施例所采用的电化学工作站购买自上海辰华公司的CHI 760型号的产品。

在本实施例中,参比电极可以采用饱和甘汞电极(购买自艾达恒盛公司的产品),对比电极可以采用铂丝电极(购买自高仕睿联公司的产品)。

另外,关于参比电极和对比电极,本领域技术人员也可以采用其他合适的电极,例如参比电极还可以采用Ag/AgCl;对比电极还可以采用石墨棒电极。

本实施例的酶生物传感器的体系基于黄嘌呤氧化酶与次黄嘌呤及黄嘌呤发生氧化还原反应的原理,将得失电子转化为电信号传输到电化学工作站上,改变电化学工作站原有的电化学响应信号,从而实现对次黄嘌呤及黄嘌呤浓度的检测。

将参比电极、对比电极和工作电极连接于电化学工作站完成整个酶生物传感器体系的构建之后,将三个电极插入到0.05M、pH=7.5的磷酸缓冲液溶液(以下简称PBS溶液)中,利用差分脉冲伏安法测试所得的相对响应电流值制作次黄嘌呤浓度的标准曲线;制作过程简述如下:取次黄嘌呤的化学标准品(购买自sigma公司)溶解于0.05M、pH=7.5的PBS溶液中,震荡1分钟,分别配制不同浓度的次黄嘌呤标准溶液(0.01μM、0.02μM、0.04μM、0.05μM、0.1μM、0.2μM,......);记录不同浓度的次黄嘌呤标准溶液的相对响应电流值,利用不同浓度的次黄嘌呤标准溶液的相对响应电流值,制作出次黄嘌呤浓度的标准曲线。按照上述同样的方法,记录不同浓度的黄嘌呤标准溶液的相对响应电流值,制作黄嘌呤浓度的标准曲线,参见图2。

主要参考资料

[1] 化合物词典

[2] 王存,孟丽,惠俊敏.聚咪唑/氮化碳新型纳米复合材料修饰电极对尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的同时检测[J].高等学校化学学报,2019,40(03):431-438.

[3] CN201811589035.8一种用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极及其酶生物传感器体系

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