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STBL3超级感受态细胞

STBL3超级感受态细胞

英文名称:STBL3 super competent cells
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
STBL3超级感受态细胞 结构式

STBL3超级感受态细胞 用途与合成方法

STBL3超级感受态细胞是为专为克隆慢病毒表达载体系统里顺向重复序列而设计的。该菌株可以降低慢病毒和其它反转录病毒长片段末端重复区意外重组的频率。这种特性是TOP10菌株没有的。与此同时,Stbl3?比SURE?细胞更稳定,能提高慢病毒载体的克隆效率。
Stbl3超级感受态细胞是操作慢病毒系统推荐使用的菌株,对慢病毒载体等较大的质粒转化的效果好,能有效减低错误重组的可能性。

STBL3超级感受态细胞
STBL3超级感受态细胞

1.Stbl3感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。

4.37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。

(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)

5.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.或LB培养基上。

6.将平板倒置放于37℃或30℃培养箱过夜培养。

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