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多糖多酚植物RNA提取试剂盒

多糖多酚植物RNA提取试剂盒

英文名称:Polysaccharide polyphenol plant RNA extraction kit
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
多糖多酚植物RNA提取试剂盒 结构式

多糖多酚植物RNA提取试剂盒 用途与合成方法

1.针对性强:专门针对多糖多酚等难提植物样本独特配置,流程更优化,结果有保障。

2.高效去除基因组:配有高效DNase I,可在柱上快速去除gDNA。

3.简便快捷:仅需1小时即可完成RNA提取实验。

4.安全低毒:无需酚和氯仿等毒性有机试剂。

本试剂盒可从植物组织,特别是富含多糖多酚或淀粉的植物组织(如棉花叶片,成熟水稻叶片,拟南芥种子,白松松针,香蕉,枇杷叶片,马铃薯块茎,苹果,梨,西瓜果肉,猕猴桃,月季,烟草,沙棘,百合等)中快速提取总RNA,可同时处理大量不同样品。

提取的总RNA纯度高,没有基因组、蛋白和其它杂质的污染,可用于RT-PCR、Real Time RT- PCR、芯片分析、Northern Blot、 Dot Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase保护分析和分 子克隆等多种下游实验。

本品基于无苯酚、氯仿RNA快速提取技术,以及基因组DNA清除柱技术(而非DNase消化),确保有效清除gDNA残留,得到的RNA可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
该试剂盒内独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,离心沉淀去除多糖多酚和次级代谢产物,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合到基因组DNA清除柱上,RNA被选择性洗脱滤过,DNA吸附在基因组DNA清除柱上而被清除。然后用乙醇调节结合条件后,总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

样本类型

样本量

RNA平均产量

纯度
(A260/A280)

香蕉果肉

100 mg

3-5 μg

1.8-2.0

西瓜果肉

100 mg

1.5-2.4 μg

1.8-2.0

苹果、梨果肉

100 mg

1.2-2 μg

1.8-2.0

红薯块茎

100 mg

5.5-9 μg

1.8-2.0

马铃薯块茎

100 mg

6-10 μg

1.8-2.0

白松松针

100 mg

15-20 μg

1.8-2.0

棉花叶片

100 mg

20-25 μg

1.8-2.0

月季叶片

100 mg

20-25 ug

1.8-2.0

枇杷叶片

100 mg

8-10 ug

1.8-2.0

水稻叶片

100 mg

20-25 ug

1.8-2.0

1 操作前在SL中加入β-巯基乙醇至终浓度5%,如475 μl SL中加入25 μl β-巯基乙醇。此裂 解液最好现用现配。配好的SL 4℃可放置一个月,裂解液SL在储存时可能会形成沉淀, 如果有沉淀出现,请加热溶解后使用。
2 植物组织裂解是否充分直接影响到RNA提取的质量和产量,本试剂盒中提供的裂解液 SL,适用于大多数植物组织的裂解,但有些植物组织( 例如玉米的乳白色胚乳,红豆种 子或小麦种子)或丝状真菌,由于次级代谢产物较特殊,异硫氰酸胍使样品产生沉淀,导致RNA提取效果不佳的现象。
3 第一次使用前应在漂洗液RW中加入无水乙醇。

  • 裂解液CLB和RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
  • 所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。
  • 取1 mL裂解液CLB至离心管内(如果CLB有析出或者沉淀需先置于65℃水浴重新溶解),在裂解液CLB中加入5% β-巯基乙醇(1 mL CLB加50 μL β-巯基乙醇)。颠倒混匀后65℃水浴中预热。多个样品按照比例放大准备。

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