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玻璃酸酶

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玻璃酸酶

中文名称:
玻璃酸酶
CAS号:
9001-54-1
英文名称:
Hyaluronidase
MF:
C18H14O7
MW:
342.29956
EINECS:
232-614-1
Mol File:
9001-54-1.mol

玻璃酸酶 性质

储存条件 
−20°C
形态
lyophilized powder
颜色
white to slightly brown
Merck 
13,4777
EPA化学物质信息
Hyaluronidase (9001-54-1)
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玻璃酸酶 用途与合成方法

玻璃酸钠注射液

玻璃酸钠又名透明质酸钠,是广泛存在于动物和人体内的生理活性物质,在人皮肤、关节滑膜液、脐带、房水、眼玻璃体中均有分布,由N-乙 酰葡萄糖醛酸反复交替而形成的一种高分子多糖体生物材料。
本品具有高度的粘弹性、可塑性、以及良好的生物相容性,在预防粘连和修复软组织方面有明显作用。可用于变形膝关节病和肩关节周围炎的 辅助治疗,临床上用于多种皮肤损伤,促进伤口愈合,对于擦伤及撕裂伤,腿部的溃疡,糖尿病性溃疡,压迫性溃疡,以及清创术、静脉淤滞 性溃疡等均有效。
玻璃酸钠为关节滑液的主要成分,是软骨基质的成分之一。在关节腔内起润滑作用,可覆盖和保护关节软骨,改善关节挛缩,抑制软骨变性变 化表面,改善病理性关节液,增加滴滑功能。

化学性质 

玻璃酸酶系从哺乳动物睾丸中提取的一种能水解玻璃黏多糖的酶,是一种白色或微黄色粉末,在水中易溶,在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。无臭。稳定性较好,420C持续加热60min活力不损失,1000C 持续加热5 min活力可保留80%。在低浓度的水溶液中较易失活,一般可用明胶或阿拉伯胶保护防止失活。Fe2+、Cu2+离子对酶有可逆抑制作用。Pb2+、Hg2+、Ni 2+、等离子对酶活性没有明显影响。在氯化钠(0.15mol/L)或硫酸鱼精蛋白的存在下,硫酸软骨素B(皮肤素)、硫酸类肝素、硫酸角质素、肝素钠及高浓度玻璃酸对玻璃酸酶的抑制作用可被逆转。
玻璃酸酶注射液为玻璃酸酶加适宜的赋形剂,经冷冻干燥的无菌制品,为白色或类白色的冻干块状物或粉末。水溶液不稳定,需临用前配制。

用途 

玻璃酸酶可作为蛋分分解酶。一般可用来加速肌肉、皮下注射药液的吸收,减轻注射部位疼痛,促进局麻药的浸润,有利于促进手术及创伤后局部水肿或血肿的消散。也可用于肠粘连。但是水杨酸类能抑制玻璃酸酶的作用。不能静脉注射。用前先做皮试,以免出现过敏反应。感染及肿痛部位禁用,以防引起扩散。小鼠皮下注射LD50>25万单位/kg;小鼠肌肉注射LD50>1.25万单位/kg。
皮下或肌肉注射,150~1500U/次,1日1~2次,先用生理盐水或注射用水溶解,再与其他注射剂混合使用;皮下输液,100ml大输液中加本品150U。

用途 

该品为抗高血压药。小鼠口服LD50为122ml/kg,大鼠LD50为90ml/kg。

生产方法 

由1-氯代酞嗪(见9720)经肼化而将1-氯代酞嗪加到水合肼中,在87-89℃搅拌回流12h,趁热过滤。滤液冷却结晶,过滤,得肼酞嗪。肼酞嗪用15%相加酸溶解成盐,再加乙醇使结晶析出,可得肼酞嗪盐酸盐。

生产方法 

方法一、牛羊睾丸提取法
切碎、提取将冻冻或新鲜羊睾丸洗净,剥除内外层及副睾丸,切碎,用绞肉机绞成糜浆,称取100kg,倒入预先配好的乙酸溶液(水90L、冰醋酸0.6L、1mol/L盐酸10L 混合而成)中,在-50以下的冻库中,每隔15min用力搅拌3~5min,使之充分提取4h,然后进行扯浆,得浆液约125~140L。浆渣备第2次提取玻璃酸酶用。
羊睾丸Hac;HCl;-50提取提取液
盐析、吊滤取第一次浆液,在不断搅拌下每升浆液中加入硫酸铵(工业用)210g。使之安全溶解,静止1h后,转入双层用涤纶袋吊滤,反复两次。次日得澄清滤液,在不断搅拌下每升加入硫酸铵290g。使之完全溶解,静止1h 后,用涤纶袋吊滤,过夜,次日拆袋,得粗制品。
提取液(NH42SO4盐析;吊滤粗品
盐析、透析取精品溶于5L的冰冷蒸馏水中,缓缓加入硫酸铵固体125g,并不断搅拌,使之完全溶解,于冷库中静置过夜,次日除去液面油脂,用胶管虹吸中层清液,用布氏漏斗过滤,上层和底层沉淀最后用布氏漏斗过滤,合并滤液。在滤液中缓缓加入750g硫酸铵,充分搅拌,待完全溶解后,于冷库中放置过夜。次日,弃去上层清液(如上层溶液浑浊不清,可在冷库中放置3~5d ,待上层溶液变清)得盐析沉淀物,再溶于0.5L冰蒸馏水中,进行透析,每袋约100ml,放在pH6.5的磷酸盐-枸橼酸缓冲液[枸橼酸7.5g、磷酸氢二钠(12个结晶水)62g、氯化钠70g加水配制成2500ml,用枸橼调整pH6.5]2500ml中,于冷库透析24h,得透析液。酶活力约250000U/ml。
粗品(NH42so4;磷酸盐-枸橼酸pH6.5;盐析;透析透析液
去热原、干燥将透析液离心分离,离心液置于冰冷的水溶中,加入Na3PO4·12H2O(150g/L即15%)溶液50ml, 缓缓加入乙酸钙(200g/L即20%)30ml,并不断搅拌。随后用氢氧化钠(0.5mol/L)调节pH至8.5,继续搅拌10min,4号垂熔玻璃漏斗过滤(滤并瓶放在冰水浴中),滤液用盐酸( 0.5mol/L)中和pH为7,冷冻干燥,得酶精制品。
透析液Na3PO4;Ca(Ac)2; pH8.5去热原精制品HCl;pH7→干燥干精制品
冻干制剂取一定量精制品溶于5%的明胶注射用水溶液中,用氢氧化钠调节pH5~7,除菌,过滤,分装,每瓶0.5ml, 冷冻干燥,即得注射用玻璃酸酶制剂,每瓶含玻璃酸酶100或150U,按睾丸质量计算收率约为20000U/kg。
干精制品5%水解明胶;pH6制剂冻干制剂成品
方法二微生物发酵法
培养、发酵培养基;
淀粉1份;棉子饼1份;谷胱粉1份;
干酵母1份;磷酸氢二钾0.1份链霉菌;300C;3d发酵发酵液
消泡剂0.4%
沉淀、分离
发酵液→浓缩液丙酮沉淀粗品色谱柱分离精制品
冷冻、干燥
精制品5%水解明胶冷冻干燥冻干制剂成品

安全信息

安全说明 
22-24/25
WGK Germany 
3
3-10
海关编码 
35079090

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