产品描述

柱式病毒RNA提取试剂盒

柱式病毒RNAout

产品及特点 

本产品是在天泽基因一管式病毒 RNAOUT 的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取微量病毒 RNA 的产品，它具有下列特点： 1. 操作简单，整个过程只需要 20 分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。 2. 灵敏度高，通过 RT-PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 50 拷贝/mL。 3. 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。 4. 如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理 1.5 mL 液体病毒样品。 5. 与 RT-PCR 和荧光 RT-PCR 兼容。 6. 价廉物美，性价比远低于国外同类产品。 7. 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

规格及成分 

成份 编号 大纸盒包装 RNA 病毒裂解液 3073a 30 mL 上柱结合液 190602 40 mL 离心吸附柱 60911 50 套通用洗柱液 60408 50 mL RNA 洗脱液 71207 10 mL 使用手册 71001sc 1 份

运输及保存 

常温运输和保存，RNA 病毒裂解液长期（1 周）放置需放 4℃，有效期一年。

自备试剂 

无

使用方法 

如果有 N 个样品，标记 N+2 个 1.5-2 mL 螺旋盖塑料离心管(如 Sarstedt CAT#:782.694.006)，多出的一个为阳性对照，一个为阴性对照。为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记，以在后续操作时区别向心面和离心面。然后各加入 0.2 mL 液体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等）。 1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入 0.2mL 自备生理盐水中挤压出液体，然后取 0.2mL 进行提取。 1.2、 如果是粪便等半固定样品，则取约 0.3mL 的样品，加入 0,3 自备生理盐水，震荡重悬，离心取 0.2mL 上清进行提取。 1.3、 如果血液，细胞培养液等含细胞的液体，可以离心用上清，也可以直接取用，但后者提取的 RNA 中有细胞的基因组 DNA 污染。血浆的抗凝剂必须是 EDTA 或 ACD，不能是肝素。使用 ACD 时由于所加入 ACD 会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用 EDTA 低 15%左右。血浆最好按 0.6mL/ 管的量分装保存，以避免反复冻融。 1.4、 如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离心，用 0.2mL 上清液（含病毒）进行提取，但此种情况下最后得到的 RNA 不可避免的会含有基因组 DNA 污染。 1.5、 如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液体在 4℃ 24,000 g 冷冻离心 60 分钟, 移弃 1.3 mL、用剩下的 0.2mL 继续操作。 2. 加入 0.6 mL RNA 病毒裂解液，振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟。注意：RNA 病毒裂解液在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。 3. 加入 0.8mL 上柱结合液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液（0.8 mL）到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟。 4. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。 5. 将剩余的另外一半裂解液（0.8mL）转移到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟。 6. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。 7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。 8. 加入 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤，可以跳过。 9. 12000 g 室温离心半分钟。 10. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-100 uL RNA 洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的 1.5 mL 离心管中，室温放置 2 分钟。 11. 12000 g 室温离心 1 分钟，离心管中收集的样品即为 RNA。 12. RNA 样品可以直接用于 RT-PCR 或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。注：病毒提取的核酸量远不足以电泳检测，提取后可通过 RT-PCR 检测，最终灵敏度可以达到 50 拷贝/mL。

相关资料

常见人类疾病相关 RNA 病毒病毒 疾病名称 类型 长度(Kb) Measles virus measles ssRNA 4.5~85 Hepatitis A Virus hepatitis type A ssRNA 7.5 Poliomyelitis virus polio ssRNA 7.8 Rubella virus German measles ssRNA 7.9 Hepatitis C Virus hepatitis type C ssRNA 9.3~9.4 Human immunodeficien cy virus AIDS ssRNA 9.7 Dengue Virus dengue ssRNA 11 Yellow fever virus yellow fever . ssRNA 11 Rabies virus rabies ssRNA 11.9 Influenza A virus influenza ssRNA 13.5 Mumps virus mumps ssRNA 15.4 Ebola virus virus hemorrhagic fever ssRNA 19

疑难解答

Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA 或 DNA)为何很难？ A：原因一是量少。病毒颗粒中的 RNA 或 DNA 是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种 RNA 分子，每种 RNA 有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸绝对量很少，不能使用电泳和测 OD 检测，只能通过 PCR 或 RT-PCR 检测，而 PCR 或 RT-PCR 的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。

关联产品 柱式病毒 DNAOUT

柱式病毒RNA提取试剂盒；PCR试剂盒

供应商联系方式

公司简介

上海康朗生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售、服务于一体的一家生物高新技术企业，专营生化试剂、标准品、基因、蛋白、抗体、Elisa试剂盒、细胞生物学，分子生物学等高生物产品。总部位于上海，并在北京、广东，江西，吉林等全国30多个省市设有分公司和代理机构。涉及的产品被中国科学院、清华、北大、复旦，上海交大，复旦医学院，上海中医药大学，华东师范大学，第二军医大学，曙光医院，浦东新区人民医院等知名科研院所广泛使用，可靠而稳定的质量和完善的售后服务确。

供应商的其它产品

• Triton Lysis Buffer-2（曲拉通裂解液-2）
• Triton Lysis Buffer（曲拉通裂解液），2X
• Triton Permeating Solution in PBS（以PBS为溶剂的曲拉通渗透液），10X
• Triton Permeating Solution in TBS（以TBS为溶剂的曲拉通渗透液），10X，pH7.4
• Triton X-100 Solution（曲拉通X-100溶液），10%（w/v）
• Tryptophan Solution（色氨酸溶液），0.25%
• Tyrosine Solution（酪氨酸溶液），0.15%
• Uracil Solution（尿嘧啶溶液），0.2%
• Valine Solution（缬氨酸溶液），1.5%
• Veronal Buffered Saline with EDTA （VBSE）（弗洛拿缓冲的含EDTA生理盐水）
• Veronal Buffered Saline with Mg++ and Ca++ （VBS++）（弗洛拿缓冲的含钙镁生理盐水）
• Veronal Buffered Saline with Mg++ and EGTA （VBSMG）（弗洛拿缓冲的含镁和ETGA生理盐水）
• Veronal Buffered Saline （VBS）（弗洛拿缓冲的生理盐水），pH7.2
• Veronal Buffered Saline （VBS）（弗洛拿缓冲的生理盐水），pH7.4
• Zinc-Fixative（锌固定液）
• Zinc-Formalin（锌-福尔马林固定液）
• Tissue Soaking Infiltrating & Protecting Solution（组织浸泡渗透保护液）
• Tricine Buffer（Tricine缓冲液），0.5M，pH6.5
• Tricine Buffer（Tricine缓冲液），0.5M，pH7.0
• Tricine Buffer（Tricine缓冲液），0.5M，pH7.4
• Tricine Buffer（Tricine缓冲液），0.5M，pH8.0
• Tricine Buffer（Tricine缓冲液），0.5M，pH8.5
• Tricine-SDS Sample Buffer（Tricine-SDS PAGE胶样品缓冲液），2X，非还原型
• Tricine Buffer（Tricine缓冲液），0.5M，pH9.0
• Tricine-SDS Sample Buffer（Tricine-SDS PAGE胶样品缓冲液），2X，还原型
• Wright Solution（瑞氏染液、美蓝伊红染液）
• Tris-Phosphate-EDTA Solution（TPE）（Tris-磷酸-EDTA溶液），10X
• Universal Agarose Gel Dissolving Solution （通用溶胶液2.0），胶回收用
• Universal Column Wash Solution通用洗柱液
• Zinc Acetate Solution （乙酸锌溶液），100mM
• Zinc Chloride Solution （氯化锌溶液），25mM
• Zinc Sulfate Solution（硫酸锌溶液），100mM
• Zymogram Developing Buffer（酶谱显色缓冲液），10X
• Zymogram Renaturation Buffer（酶谱复性缓冲液），10X
• Zymogramm Sample Buffer（酶谱样品缓冲液）
• Tris-Maleate Buffer(Tris-马来酸缓冲液)，02M，pH5.0
• Tris-Maleate Buffer(Tris-马来酸缓冲液)，02M，pH6.0
• Tris-Maleate Buffer(Tris-马来酸缓冲液)，02M，pH7.0
• Tris-Maleate Buffer(Tris-马来酸缓冲液)，02M，pH8.0
• Tris-Malic Acid Buffer（Tris-苹果酸缓冲液），1M，pH7.0
• Tris-Malic Acid Buffer（Tris-苹果酸缓冲液），1M，pH8.0
• 无核酸酶水（无DNA酶和无RNA酶水、DNase and RNase-free Water）
• 戊二醛固定液(PBS，pH7.0），2.0%
• 水饱和酚-氯仿-异戊醇混合液（RNA提取用）（25:24:1），pH8.0
• Tris-Malic Acid Buffer（Tris-苹果酸缓冲液），1M，pH5.0
• Tris-Malic Acid Buffer（Tris-苹果酸缓冲液），1M，pH6.0
• Universal KGB Buffer（通用内切酶缓冲液），10X
• 固相RNse清除剂
• 气相RNase清除剂
• 柱式病毒RNA提取试剂盒
• 拭子病毒保存液，核酸检测专用（没分装）
• 拭子病毒保存液，核酸检测专用（已分装，2.5mL/管，带采样拭子、已经分装成50管的保存液，专用包装塑料袋）
• 拭子病毒采样及保存试剂盒，病毒培养用（没分装）
• 拭子病毒采样及保存试剂盒，病毒培养用（已分装，2.5mL/管，带采样拭子、已经分装成50管的保存液，专用包装塑料袋，仿友康产品）
• 一步式RT-PCR Mix
• 一步式染料法qRT-PCR试剂盒
• 一步式探针法qRT-PCR试剂盒
• 鲍疱疹样病毒PCR试剂盒
• 鲍肌肉萎缩症病毒PCR试剂盒
• 鲍球状病毒PCR试剂盒
• 伞枝梨头霉PCR试剂盒
• 多食棘阿米巴属通用PCR试剂盒
• 武氏盾螨PCR试剂盒
• 莱氏无胆甾原体PCR试剂盒
• 无色杆菌属通用PCR试剂盒
• 鲍氏不动杆菌（鲍曼不动杆菌）PCR试剂盒
• 鲁氏不动杆菌PCR试剂盒
• 不动杆菌属通用PCR试剂盒
• 枝顶孢霉PCR试剂盒
• 伴放线放线杆菌PCR试剂盒
• 猪胸膜肺炎放线杆菌PCR试剂盒
• 马杜拉放线菌PCR试剂盒
• 白乐杰马杜拉放线菌PCR试剂盒
• 牛型放线菌PCR试剂盒
• 欧洲放线菌PCR试剂盒
• 戈氏放线菌PCR试剂盒
• 衣氏放线菌PCR试剂盒
• 内氏放线菌PCR试剂盒
• 化脓放线菌PCR试剂盒
• 放线菌属通用PCR试剂盒
• 腺伴随病毒PCR试剂盒
• 腺病毒A型PCR试剂盒
• 腺病毒B型PCR试剂盒
• 腺病毒C型PCR试剂盒
• 腺病毒D型PCR试剂盒
• 腺病毒E型PCR试剂盒
• 腺病毒F型PCR试剂盒
• 腺病毒通用PCR试剂盒
• 嗜水气单胞菌PCR试剂盒
• 斑点气单胞菌PCR试剂盒
• 灭鲑气单胞菌PCR试剂盒
• 温和气单胞菌PCR试剂盒
• 气单胞菌通用PCR试剂盒
• 蜂房小甲虫PCR试剂盒
• 阿菲波菌属通用PCR试剂盒
• 非洲猪瘟病毒PCR试剂盒
• 放线共生放线杆菌PCR试剂盒
• 荚膜阿耶罗菌PCR试剂盒
• 类天花病毒PCR试剂盒