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溶血隐秘杆菌PCR试剂盒

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基本信息

产品价格:
¥1490
中文名称:
溶血隐秘杆菌PCR试剂盒
英文名称:
Arcanobacterium haemolyticum
发布时间:
2020-08-04 01:21:17
包装:
50次

上海康朗生物科技有限公司

  • 会员等级: 企业会员 1年
  • 松江区新桥镇卖新公路2077号3089室

产品属性

产品名称:
溶血隐秘杆菌PCR试剂盒
产品英文名称:
Arcanobacterium haemolyticum
包装价格:
50次/1490RMB
保存条件:
-20℃
纯度规格:
99.99%
产品类别:
PCR试剂盒
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产品描述

溶血隐秘杆菌PCR试剂盒

特别提示:包括溶血隐秘杆菌PCR试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:溶血隐秘杆菌PCR试剂盒
英文名称:Arcanobacterium haemolyticum
产品规格:50次
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。

产品名称

方法

规格

价格

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溶血隐秘杆菌PCR试剂盒产品及特点:
因此快速灵敏检测溶血隐秘杆菌具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增溶血隐秘杆菌,与其他植物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
溶血隐秘杆菌PCR试剂盒规格及成分:

成分

编号

十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0

1

1 mL(红盖)

超纯水

2

1 mL(亮黄色)

溶血隐秘杆菌 PCR 引物混合液

3

100 μL(白盖)

溶血隐秘杆菌 PCR 阳性对照

(1×10E8 拷贝/μL)

4

50 μL(黄盖)

核酸释放剂(试用装)

5

20 次(1 mL,绿盖)

使用手册

6

1 份

运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:样品 DNA。
溶血隐秘杆菌PCR试剂盒使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 溶血隐秘杆菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

N+2 个样品管

PCR 阴性对照

PCR 阳性对照

PCR MagicMix 3.0

各 20 μL

20 μL

20 μL

溶血隐秘杆菌PCR引物混合液

各 2 μL

2 μL

2 μL

N+2 个样品 DNA 模板

各 18 μL

--

--

PCR 阴性对照(水)

--

18 μL

--

PCR 阳性对照(溶血隐秘杆菌

PCR 阳性对照的 1000

倍稀释液)

--

--

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR 反应(35 个循环)

95℃

15 sec

57℃

15 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

10 min

三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
PCR常见问题的常见原因
1. cDNA产量的很低可能的原因:
1) RNA模板质量低
2)对mRNA浓度估计过高
3) 反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足
4) 同位素磷32过期
5) 反应体积过大,不应超过50μl
2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅
1) 最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系
2)与反应起始时RNA的总量及纯度有关
3)建议在试验中加入对照RNA
4)第一链的反应产物在进行PCR扩增时,在总的反应体系中的含量不要超过1/10
5)建议用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物(GSP)用于第一链合成。由于RNA模板存在二级结构,如环状结果,有可能导致GSP无法与模板退火;或SSⅡ反转录酶无法从此引物进行有效延伸。
6)目的mRNA中含有强的转录中止位点,可以试用以下方法解决:
a. 将第一链的反应温度提高至50℃。
b. 使用随机六聚体代替Oligo(dT)进行第一链反应。

 

3. 产生非特异性条带
1) 用RT阴性对照检测是否被基因组DNA污染。如果RT阴性对照的PCR结果也显示同样条带,则需要用DNase I重新处理样品。
2) 在PCR反应中,非特异的起始扩增将导致产生非特异性结果。在低于引物Tm 2至5℃的温度下进行退火,降低镁离子或是目的DNA的量将减少非特异性结果的产生。
3) 由于mRNA剪切方式的不同,根据选择引物的不同将导致产生不同的RT-PCR结果。
4. 产生弥散(smear)条带
1) 在PCR反应体系中第一链产物的含量过高
2) 减少引物的用量
3) 优化PCR反应条件/减少PCR的循环次数
4) 在用DNase处理被DNA污染的RNA样品时,其产生的寡核苷酸片段会产生非特异性扩增,一般会显示为弥散背景。
5. 产生大分子量的弥散条带
1) 大多数情况下是由于退火温度过低而导致的非特异性的起始及延伸产生的
2) 对于长片段的PCR,建议将反应体系中cDNA的浓度稀释至1:10(或1:100-1:200)
6. 在无反转录酶的情况下,对照RNA获得扩增结果

溶血隐秘杆菌PCR试剂盒;PCR试剂盒

供应商联系方式

联系人:
蔡盼
公司名称:
上海康朗生物科技有限公司
电话:
021-61998208
手机:
18217752821
邮箱:
sales@klbio.cn
地址:
松江区新桥镇卖新公路2077号3089室

公司简介

上海康朗生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售、服务于一体的一家生物高新技术企业,专营生化试剂、标准品、基因、蛋白、抗体、Elisa试剂盒、细胞生物学,分子生物学等高生物产品。总部位于上海,并在北京、广东,江西,吉林等全国30多个省市设有分公司和代理机构。涉及的产品被中国科学院、清华、北大、复旦,上海交大,复旦医学院,上海中医药大学,华东师范大学,第二军医大学,曙光医院,浦东新区人民医院等知名科研院所广泛使用,可靠而稳定的质量和完善的售后服务确。

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溶血隐秘杆菌PCR试剂盒生产厂家及价格

产品名称:
溶血隐秘杆菌PCR试剂盒
价格:
1490次
供应商名称:
上海康朗生物科技有限公司
发布时间:
2020-08-04
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溶血隐秘杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
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上海泽叶生物有限公司
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上海泽叶生物有限公司
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2020-08-04
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