EFO-27 Adherent人卵巢腺癌细胞系

"EFO-27 Adherent人卵巢腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
EFO-27 Adherent人卵巢腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
K299细胞系相关产品：CL34细胞、H-2347细胞、NK-92细胞
MKN-1细胞系相关产品：SNB-19细胞、SUM-159-PT细胞、HDLM-2细胞
NCIH1781细胞系相关产品：Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CORL105细胞系相关产品：HT-29细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、MDA-MB 361细胞
NCI-H1838细胞系相关产品：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞
ZR-75-1细胞系相关产品：H-522细胞、G-Olig2细胞、DMS-114细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
EFO-27 Adherent人卵巢腺癌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
SKES1细胞系相关产品：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞
Saos2细胞系相关产品：BHK21细胞、CL MC/9细胞、RH-30细胞
HSC5细胞系相关产品：SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
LA-N-1细胞系相关产品：HOP-62细胞、B16F10细胞、CHG-5细胞
C4I细胞系相关产品：V 79-4细胞、SL-1细胞、MUM2B细胞
MV4-11细胞系相关产品：EBTr (NBL-4)细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、SKLU01细胞
Det 562细胞系相关产品：Loucy细胞、G402细胞、NCI-H1882细胞
NFHIOSE-80细胞系相关产品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、RBL2H3细胞、COLO394细胞
VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
IPAM-WT细胞系相关产品：Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞
U343细胞系相关产品：HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞
H2085细胞系相关产品：Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
GNM细胞系相关产品：SW579细胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、SK.MEL.5细胞
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U2932细胞系相关产品：RL95细胞、Rat-1细胞、HUT-226细胞
COLO-680N细胞系相关产品：HEK-293FT细胞、KP 4细胞、HGSMC细胞
NCI-H2087细胞系相关产品：SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
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NCI-H295细胞系相关产品：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
MDA361细胞系相关产品：HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞
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Strain KB细胞系相关产品：6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
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CV-1 in Origin Simian-1细胞系相关产品：H-1993细胞、PG-4 (S+L-)细胞、TF-1a细胞
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NBLS细胞系相关产品：CEF细胞、RT-BM 1细胞、RK 13细胞
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B16F1细胞系相关产品：870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
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H146细胞系相关产品：NCTC 3960细胞、CWR22-Rv1细胞、HFLS-OA细胞
Mel-624细胞系相关产品：CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞
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P3 (Jiyoye)细胞系相关产品：hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
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HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞系相关产品：Y3M细胞、WM266mel细胞、VMCUB-1细胞
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