载体构建和蛋白表达服务 用途与合成方法
载体构建是以某个质粒为基础(如pBR322),插入特殊的酶切位点、抗性基因、供筛选用的标记基因等,构建成可以插入外源基因的新载体的过程。载体构建是分子生物学研究中最常用的实验技术。哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供最接近于天然状态的翻译后修饰,在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。
1. 以PCR为基础的各类载体构建,如细菌表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体等;
2. 基因突变,包括单点突变,多点突变,基因缺失等;
3. 载体改造。
4、表达载体的小试表达验证
5、表达产物SDS—PAGE或者WB鉴定(目前暂无其它鉴定)
6、Western blot检测转染质粒的表达情况
7、表达蛋白体内和体外功能研究
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2020-02-05
载体构建和蛋白表达服务的内容与说明