概述 应用

启动子、增强子报告基因载体构建

启动子、增强子报告基因载体构建,,结构式
启动子、增强子报告基因载体构建
  • CAS号:
  • 英文名:Promoter, enhancer reporter gene vector construction
  • 中文名:启动子、增强子报告基因载体构建
  • CBNumber:CB65536795
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

启动子、增强子报告基因载体构建性质、用途与生产工艺

  • 概述

    启动子/增强子报告基因载体构建,方法是应用PCR技术,从基因组DNA中扩增出待构建基因的启动子/增强子DNA序列,构建于报告基因上游,分别转染体外培养的细胞中,分析启动子和增强子序列细胞的基因表达调控作用。

    启动子、增强子报告基因载体构建

  • 应用

    1. 构建人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)启动子/增强子调控报告基因表达载体,探讨hMAM启动子/增强子序列在乳腺癌细胞中的特异性调控作用。方法应用PCR技术,从基因组DNA中扩增出hMAM启动子/增强子DNA序列,构建于PGL3报告基因上游,分别转染体外培养的乳腺癌细胞MDA—MB-415、T47D及胃癌细胞7901,分析启动子和增强子序列对乳腺癌细胞的基因表达调控作用。结果酶切图谱分析、DNA序列测定表明成功构建hMAM启动子/增强子调控的表达载体;荧光素酶报告基因检测结果分析表明,hMAM启动子/增强子能够调控报告基因的表达。结论hMAM启动子/增强子,在MDA—MB-415乳腺癌细胞具有调控基因表达的作用;
    2. 利用前列腺特异性抗原 (pros—tate—specific antigen,PSA)组织特异性表达的特点,克隆 出其上游增强子 (prostate-specific anti—gen enhancer,PSAE)和启动子(prostate—specific antigen promoter,PSAP)片断,并对其表达效率和组织特异性表达进行初步研究。方法:从前列腺癌组织提取基因组 DNA,并采用PCR方法分别扩增 PSA 增强子和启动子序列;利用报告基因pEGFP一1,分别 构建含不同调控序列的表达载体 ;脂质体介导基因转染不同细胞并观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达情况。

启动子、增强子报告基因载体构建上下游产品信息
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