胎球蛋白的制备

背景及概述^[1]

胎球蛋白(fetuin，α2-HS糖蛋白，分子量45kda--65 kda)是一种由肝脏合成的糖蛋白，广泛存在于哺乳动物(包括人、牛、鼠等)胚胎期体内，以血浆、脑脊液、肝脏及骨骼中含量为高。牛的胎球蛋白(fetuin)含近乎 30％的糖，含有2个N-末端和一个相对较小的C-末端区域。

尽管胎球蛋白(fetuin)被发现于1944年，但其功能和用途尚不十分清楚。文献报道，胎球蛋白(fetuin)能够增加细胞生长率以及提高蛋白质的表达。由于其在细胞培养中抑制蛋白水解酶的活性，故能加强细胞间的接 触和细胞的延伸。目前，胎球蛋白(fetuin)主要用于细胞培养，特别是在无血清细胞培养中能增加细胞生长和复制。

应用^{[2] [3]}

CN201310165956公开了一种以含唾液酸胎球蛋白磁珠富集流感病毒的方法，包括以下步骤：(1)用涡旋仪将羧基化磁性微球进行震荡分散；(2)用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),将羧基化磁性微球的羧基活化，得到具有羧基活性的磁性微球；(3)将溶解的胎球蛋白直接加入到(2)所活化的磁性微球中进行共价结合；(4)将(3)中结合上胎球蛋白的磁性微球直接加入到待检液体中进行病毒的富集。本发明方法将建立好的胎球蛋白磁性微球直接加入到待检液体中进行病毒富集，富集后即可检测，不需要经过离心、沉淀等中间环节，节省时间，且不需要特殊仪器，具有快速敏感、抗干扰能力强、方便经济、简单实用，不污染环境等优点。

CN201710027773报道了一种毛囊干细胞的无血清培养基及其制备方法，该培养基由低糖DMEM基础培养基和添加成份组成，所述添加成份及其含量如下：血清替代物5-10％ (v/v)、胎球蛋白0.1-5mg/ml、维生素C35-80ng/ml、L-谷氨酰胺1.5-5mmol/ml、表皮生长因子1-20ng/ml、葡萄糖5-15μM、2-巯基乙醇25-120μM、青链霉素双抗溶液2-15μM。采用该无血清培养基体外培养时，毛囊干细胞大量快速增长，且生长稳定，纯度高，且该无血清培养基的制备方法简单，保留了培养基中各组分的有效活性。

制备^[1]

胎球蛋白制剂的制备方法有多种，下面是其中一种(以胎牛血清做原料为例)：

胎牛血清加入2-3倍体积的0.03-0.05M醋酸锌，用28.5％-35％乙醇调节 pH值至6-6.8，-5℃下放置12-16小时，离心后弃去沉淀，收集上清液，加 入1.0-2.0M醋酸钡及95％乙醇而获得终浓度为0.02或0.04M钡离子； 25％-45％乙醇，调节pH值到6或6.7放置2小时，离心，弃去沉淀，收集上 清液，加入95％乙醇使浓度为40％或50％乙醇放置12-16小时，离心，沉淀(得 到胎球蛋白，FETUIN)。

按照常规的药物制剂方法，可将胎球蛋白(fetuin)制备成临床上适用 的药物剂型。例如，粉针剂，水针剂，输液剂，皮下给药制剂及其它释药系统。胎牛血清加入3倍体积的0.05M醋酸锌，35％7醇调节pH值至6下放置 12-16小时，离心后弃去沉淀，收集上清液，加入1.5M醋酸钡及95％乙醇而 获得终浓度为0.04M钡离子(Ba++)；30％乙醇，调节pH值到6放置2小时， 离心，弃去沉淀，收集上清液，加入95％7醇使浓度为50％乙醇放置12-16 小时，离心，沉淀(胎球蛋白，FETUIN)，弃去上清液，用3％甘露醇注射用 水溶解得到胎球蛋白溶液；反复无菌过滤，分装，冷冻干燥，即得胎球蛋白 (FETUIN)粉针剂。

主要参考资料

[1]CN201310165956.2一种以含唾液酸胎球蛋白磁珠富集流感病毒的方法

[2] [中国发明,中国发明授权] CN200410091034.2 一种糖蛋白在制药中的应用

[3]CN201710027773.2一种毛囊干细胞的无血清培养基及其制备方法