小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒的操作步骤

小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒概述^[1]

小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Endostatin,ES ELISA Kit，用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中内皮抑素(ES)的含量。

小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒工作原理^[1]

小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠内皮抑素(ES)抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠内皮抑素(ES)与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠ES抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠内皮抑素(ES)抗体与结合在包被抗体上的小鼠内皮抑素(ES)结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，小鼠内皮抑素(ES)浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠ES的浓度。 

小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒操作步骤^[1]

1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL， 37℃孵育90分钟

2. 加入100μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟

3. 洗涤3次

4. 加入100μL酶结合物工作液， 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5次

6. 加入90μL底物溶液， 37℃孵育15分钟左右

7. 加入50μL终止液，立即在450nm波长处测量OD值

8. 结果计算

主要参考文献

[1] 彭星辰；李杭；谭诗生；杨飞月。重组内皮抑素联合吉西他滨对小鼠肺癌移植瘤生长的抑制作用。山东医药。