2号染色体开放阅读框抗体的应用

背景^[1-3]

2号染色体开放阅读框抗体是可以特异性结合2号染色体开放阅读框先关蛋白的一种单克隆免疫蛋白。2号染色体是人类的23对染色体之一。在正常的人类体细胞中，会有1对2号染色体。这条染色体是人类所拥有的第二大染色体，拥有2.37亿个碱基对，其占有的DNA大小，大约是细胞中DNA总数的8%。2号染色体所拥有的基因数目并不确定，遗传学研究估计大约有1888个基因。重要的发育调控基因之一HOXD homeobox基因丛集（gene cluster）位在这条染色体上。

在分子生物学中，开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)从起始密码子开始，是DNA序列中具有编码蛋白质潜能的序列，结束于终止密码子连续的碱基序列。由于密码子（codon）读写起始位点的不同，DNA序列可能按六种ORF阅读和翻译（每条链三种，对应三种不同的起始位点）。ORF识别则是确定哪种开放阅读框对应真正的多肽编码序列的过程。开放阅读框[open reading frame，ORF]是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。在mRNA序列中，每三个连续碱基(即三联“密码子”）编码相应的氨基酸。其中有一个起始密码子AUG和三个终止密码子UAA，UAG，UGA。核糖体从起始密码子开始翻译，沿着mRNA序列合成多肽链并不断延伸，遇到终止密码子时，多肽链的延伸反应终止。由于读写位置不同，ORF在两条链上具有六种可能性。

应用^[4][5]

用于急性白血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星不稳定性研究

急性白血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星的不稳定性改变，以推断错配修复基因突变、缺失变化对于急性白血病发生、发展过程中的作用与意义。方法选取急性白血病患者骨髓及口腔黏膜细胞标本各53例，其中急性粒细胞白血病(AML)33例，急性淋巴细胞白血病(ALL)20例，另外收集慢性粒细胞白血病(CML)标本5例，骨髓异常增生综合征(MDS)3例。选取2号染色体上两个错配修复基因(hMSH2、hPMS1)连锁的四个微卫星位点(D2s123、D2s119、D2s117、D2s115)进行多重PCR扩增，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳／银染，观察微卫星不稳定性(microsatellite instability，MSI)及杂合性缺失(loss of heterozygocyte，LOH)发生情况，并进行分析。结果53例急性白血病患者中，MSI的检出率为69.8％(37／53)，共78例次。hMSH2附近的D2s123，D2s119位点分别有16例／22例发生MSI，发生率约为30.2％／41.5％；其中LOH的发生率分别为9.4％(5／53)，7.5％(4／53)。

与hPMS1基因连锁的D2s117和D2s115两个位点，MSI的检出率为33.9％(18／53)，39.6％(21／53)；其中LOH则分别有7.5％(4／53)和9.4％(5／53)为阳性。四位点中D2s119位点的不稳定性表达率最高，AML患者中MSI发生率为36.4％(12／33)，ALL患者为30％(6／20)。此4位点在AML，ALL中的表达的差别均无统计学意义(查表法)。有2处或2处以上发生MSI(RER+)的有28例。4例初发CML均未检到微卫星异常改变，而1例加速期CML出现了3个位点的MSI。另一例MDS(RAEB-T)检出2位点的不稳定性变化。讨论急性白血病患者2号染色体上两个错配修复基因连锁微卫星均可检测到高频率的MSI和LOH，说明此错配修复基因的突变与急性白血病的发生、发展有关。多个位点的MSI现象说明急性白血病的发生是一个多部位、多步骤染色体突变累积的结果。

参考文献

[1]Deficiency of the ATM protein expression defines and aggressive subgroup of B-cell chronin lymphocytic leukemia.Starostik P,Mansgouri T,O’BrienS,et al.Cancer Research.1998

[2]Detection of heteroduplex DNA molecules among the products of Sacchromytes cerevisiae meiosis.Lichten M,Goldon AC.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.1990

[3]Instability of short tandem repeats(microsatellite)in human cancer.Wooster R,Cleton-Jansen AM,Collins N,et al.Nature Genetics.1994

[4]Comprehensive alletotyping of human renal cell carcinomas using microsatellite DNA probes.Thrash-Bingham CA,Salazar H,Freed JJ,et al.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.1995

[5]任志华.急性白血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星不稳定性研究[D].青岛大学,2003.