精子形态学快速染色液(Diff-Quik法)的应用

背景^[1-3]

精子形态学快速染色液(Diff-Quik法)属于WHO推荐的精子形态学染色，其染色原理是精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而着色；嗜酸性蛋白质解离的氨基带正电荷，能与带负电荷的酸性染料(如嗜酸性氧杂蒽、伊红)结合而被染成红色；嗜碱性蛋白质解离的羧基带负电荷，能与带正电荷的碱性染料(嗜碱性硫氮杂苯、亚甲蓝)结合而被染成蓝色；嗜中性蛋白质解离的带正电荷的氨基和带负电荷的羧基相等，同时结合相等的酸性染料和碱性染料而呈紫红色，但因解离电荷相等，故着色较弱。

该染色液主要用于精子(细胞)形态的评估，含固定液，非常适合用于批量浸染，且背景清晰无沉渣，该染色液仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。Diff-Quik染色是在Wright染色基础上改良而来的一种快速染色方法，是细胞学检查中常用的染色方法之一，染液是采用世界卫生组织(WHO)推荐的快速染色方法而配制，与Wright Stain类似都是利用Romanowsky Stain技术原理改良而来的，染色结果与瑞氏染色液也极其相似，但迪夫快速染色所需的时间极短，一般90s以内即可完成染色。精子形态的评估可以采用Diff-Quik染色液。

应用^[4][5]

用于高脂饮食对雄鼠及男性的血脂和精液质量的影响研究

建立小鼠高脂饮食模型和标准饮食模型,检测小鼠血脂水平及精液质量来探究高脂饮食小鼠与标准饮食小鼠的血脂水平和精液质量的差异;通过计算男性饮食脂肪摄入量,检测血脂、精液质量和血清性激素水平来探究高脂饮食男性与非高脂饮食男性血脂、精液质量和血清性激素的差异;进一步探究高脂血症和精液质量的关系。为精液质量下降的高脂饮食男性提供饮食建议和调控血脂的指导。方法一:动物实验（1）本课题使用6-8周龄雄鼠,分为高脂饮食组和标准饮食组,予高脂饮食（含60%脂肪的高脂饲料）及标准饮食（含10%脂肪的标准饲料）喂养8周和23周后,测量鼠重、计算睾丸系数和附睾系数。睾丸及附睾组织制作石蜡切片,HE染色后显微镜下观察生殖器官、组织的细胞学改变,探讨不同饮食组生殖器官和组织的细胞学差异。（2）使用全自动生化分析仪检测小鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,探讨不同饮食组的血脂差异。（3）提取小鼠精液,通过显微镜观察和计数精子数目、活力。使用精子（细胞）形态学快速染色液（Diff-Quik）染色并观察精子,计算精子的畸形率,探讨不同饮食组精液质量的差异。

参考文献

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[4]A high‐fat diet negatively affects rat sperm mitochondrial respiration[J].A.Ferramosca,A.Conte,N.Moscatelli,V.Zara.Andrology.2016(3)

[5]汪沭源.高脂饮食对雄鼠及男性的血脂和精液质量的影响[D].东南大学,2018.