人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定标本中人抗纺锤体抗体(MSA)水平。用纯化的人抗纺锤体抗体(MSA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入骨保护素（OPG），再与HRP标记的骨保护素（OPG）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗纺锤体抗体(MSA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人抗纺锤体抗体(MSA)浓度。

纺锤体(Spindle Apparatus)，形似纺锤，是产生于细胞分裂前初期(Pre-Prophase)到末期(Telophase)的一种特殊细胞器。其主要元件包括微管(Microtubules)，附着微管的动力分子分子马达(Molecular motors),以及一系列复杂的超分子结构。一般来讲，在动物细胞中，中心体是纺锤体的一部分。高等植物细胞的纺锤体不含中心体。而真菌细胞的纺锤体含纺锤极体(Spindle Pole Body)，一般被视为中心体的同源细胞器。在细胞分裂中，其主要作用有两个部分。其一为排列与分裂染色体。纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。纺锤体的正常生成是染色体排列的必要条件。纺锤体生成完毕后一般会有5-20分钟的延迟，以供细胞调整着丝点上微管束的极性，以及决定是否所有的着丝点都附着正确。此后细胞进入分裂后期，染色体分裂为两组数目相等的姐妹染色单体。同样，纺锤体的完整性决定这个分裂过程在时间和空间上的准确性。

应用^[4][5]

用于抗纺锤体抗体和抗着丝点抗体检测在诊断小细胞肺癌中的临床应用研究

采用以HEp-2细胞和全新HEp-20-10细胞株为基质的间接免疫荧光法（IIF）及ELISA法检测MSA；采用以HEp-2细胞为基质的IIF法检测ACA和抗核抗体(ANA)，并对其结果进行回顾性分析。结果：①以HEp-2细胞为基质的IIF法检测SCLC患者MSA和ACA的阳性率分别为31.7%和28.1%，均显著高于其他病种患者及健康对照，P<0.01，差别有显著统计学意义；②以HEp-20-10细胞为基质的IIF法检测SCLC患者MSA，阳性率提高到37.1%；③ELISA法检测SCLC患者MSA的平均浓度为92.0pg/ml，显著高于其他病种患者及健康对照，P<0.01，差别有显著统计学意义；④ELISA法、HEp-2细胞和HEp-20-10细胞为基质的IIF法检测SCLC患者MSA经一致性分析比较，HEp-2细胞基质的IIF法和HEp-20-10细胞基质的IIF法kappa值为0.855，一致性很好；ELISA法与IIF法比较，一致性一般，ELISA法更好；⑤串并联分析显示ELISA法与IIF法联合检测可使SCLC患者MSA阳性检出率达50.9%，约登指数为0.459；⑥两法检测MSA诊断SCLC的临床评价比较，ELISA法敏感性、准确性和阴性预测值；而HEp-20-10细胞基质的IIF法特异性、阳性预测值和阳性似然比更佳。⑦SCLC、其他病种患者中ANA阳性率显著高于健康对照。结论：SCLC患者血清中存在MSA和ACA自身抗体，二者与SCLC有很强的正相关性，可能参与SCLC的发生发展，对SCLC的早期检测、临床诊断及潜在的治疗方法有一定应用价值。

参考文献

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[5]明凤.抗纺锤体抗体和抗着丝点抗体检测在诊断小细胞肺癌中的临床应用[D].南昌大学,2014.