APC anti-human CD19的应用

背景^[1-3]

APC anti-human CD19是一类以anti-human CD19为抗原的APC多克隆抗体，可以特异性结合human CD19，主要用于检测CD19的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

CD19检测以免疫组织化学方法为主，利用抗原抗体发生特异性结合的特点，通过特异性标记抗体与CD19抗原结合，进行孵育并通过染色镜检、仪器计数等方式对标记进行识别，从而达到定性或定量检测的目的。流式细胞术可检测全体B细胞及毛细胞白血病细胞上的CD19，免疫组织染色法可检测全体B细胞及滤泡树状细胞上的CD19。其他方法有免疫荧光染色、免疫金银染色等。

CD19是分子量为95kDa的糖蛋白，表达于前B细胞和成熟的B细胞膜表面，与B细胞的活化调节和发育调节相关，在T细胞和正常的粒细胞上无表达。此抗体主要标记正常B细胞和肿瘤性B细胞。

CD19是参与B细胞活化与增殖的重要膜抗原之一，是所有B细胞共有的表面标志，B细胞活化后不消失，是最重要的B细胞标记因子，同时CD19也是B细胞表面的传达信号复合体的构成部分，CD19的细胞外部分同其他膜抗原结合进行信号传导。

CD19阳性细胞升高见于B淋巴细胞系统的恶性肿瘤，如CD19在95%急性前B淋巴细胞白血病细胞和94%急性成熟B淋巴细胞白血病细胞表达，也见于慢性淋巴细胞性白血病和Burkitt淋巴瘤等；CD19阳性细胞降低见于体液免疫缺陷病，如无丙种球蛋白血症、长期使用免疫抑制剂者等。

故CD19检测可对上述疾病进行明确的病因诊断，并为鉴别诊断提供依据。此外由于CD19广泛存在于B淋巴细胞系统恶性肿瘤细胞表面，故可在白血病及淋巴瘤的免疫疗法中作为细胞表面的靶点。

应用^[4][5]

用于CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Breg在PBC患者外周血中表达及对Th1细胞分化影响的研究

观察CD19+CD24hiCD38hiBreg在PBC患者外周血中的表达情况。分析该群细胞与疾病的相关性,并初步探讨PBC外周血中CD19+CD24hiCD38hiBreg对辅助性T细胞1(T helper cell 1,Thl)、辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)细胞分化的影响,为PBC免疫机制的研究及未来治疗策略的开发提供新的实验依据。

方法：1.采集PBC患者组与健康对照组(HC)的EDTA抗凝血,密度梯度离心法提取外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),流式细胞仪检测CD19+B细胞以及CD19+CD24hiCD38hiBreg在CD19+细胞的表达频率。比较上述两者在PBC患者与正常人中的变化情况。

2. 采集PBC患者组血清,用Modular PPT生化分析仪检测患者的ADA、ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL、IBIL、TBA等肝功相关指标,分析其与CD19+CD24hiCD38hiBreg的相关性。

3. 流式细胞仪检测HC组中Thl、Th17细胞的频率,分别与HC组的CD19+CD24hiCD38hiBreg进行相关性分析,初步分析HC组中Thl、Th17细胞的频率与CD19+CD24hiCD38hiBreg的潜在关系。

4.流式细胞仪检测PBC组中Thl、Th17细胞的频率,分别与PBC组的CD19+CD24hiCD38hiBreg进行相关性分析,初步分析PBC组中Th1、Th17细胞的频率与CD19+CD24hiCD38hiBreg的潜在关系。

参考文献

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[2]Impaired function of CD 19+CD 24hi CD 38hi regulatory B cells in patients with pemphigus[J].H.‐Q.Zhu,R.‐C.Xu,Y.‐Y.Chen,H.‐J.Yuan,H.Cao,X.‐Q.Zhao,J.Zheng,Y.Wang,M.Pan.Br J Dermatol.2015(1)

[3]Interleukin-10-Producing Plasmablasts Exert Regulatory Function in Autoimmune Inflammation[J].Masanori Matsumoto,Akemi Baba,Takafumi Yokota,Hiroyoshi Nishikawa,Yasuyuki Ohkawa,Hisako Kayama,Axel Kallies,Stephen L.Nutt,Shimon Sakaguchi,Kiyoshi Takeda,Tomohiro Kurosaki,Yoshihiro Baba.Immunity.2014

[4]The diagnosis of primary biliary cirrhosis[J].Christopher L.Bowlus,M.Eric Gershwin.Autoimmunity Reviews.2014(4-5)

[5]吴华仙.CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Breg在PBC患者外周血中表达及对Th1细胞分化影响的研究[D].广州中医药大学,2016.