GOTO人神经母细胞瘤细胞株的应用

背景^[1-3]

GOTO人神经母细胞瘤细胞株是由日本学者GOTO分离自一例神经母细胞瘤患者所建立的稳定细胞系。神经母细胞Neuroblast是一组神经干细胞，负责产生中枢神经系统中的多种神经元和胶质细胞。在中枢神经系统原基和神经节原基等含有这种细胞和其他类型细胞。神经母细胞初呈纺锤形，后来从两端生出突起。其前端在进行变形虫样运动的同时，有着极为明显的延长，最后分化为神经突起。

神经母细胞瘤属于神经内分泌性肿瘤，可以起源于交感神经系统的任意神经脊部位。其最常见的发生部位是肾上腺，但也可以发生在颈部、胸部、腹部以及盆腔的神经组织。目前已知有少数几种人类肿瘤，可自发性地从未分化的恶性肿瘤退变为完全良性肿瘤。神经母细胞瘤就属于其中之一。

目前关于神经母细胞瘤真正的病因尚不清楚。一些遗传易感因素被发现与神经母细胞瘤的发病相关。家族型神经母细胞瘤被证明与间变淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）的体细胞突变（somatic mutation）所导致。此外，在神经母细胞瘤还发现有许多分子突变。N-myc基因的扩增突变在神经母细胞瘤也很常见。其扩增类型呈双向分布：在一个极端为3-10倍扩增，在另一个极端为100-300倍扩增。N-myc基因的扩增突变往往与肿瘤的扩散相关。LMO1基因被证明与肿瘤的恶性程度相关。

应用^[4][5]

用于miR-483-3p对人神经母细胞瘤增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及作用机制研究

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类广泛存在真核生物体内的长度为21～25个核苷酸的内源性非编码单链RNA。miRNA通过与RNA诱导沉默复合物(RNA induced silence complex,RISC)结合形成非对称性的RISC,而结合RISC后可与靶基因结合而达到降解mRNA或抑制mRNA转录后的翻译,最终通过调节蛋白表达而在体内多个重要环节中发挥作用。

大量研究表明miRNA在肿瘤中存在明显异常表达,而niRNA的异常表达对肿瘤的增殖、侵袭及转移均发挥着重要的作用。前期Guo等通过miRNA基因芯片检测高危组神经母细胞瘤与低危组神经母细胞瘤的miRNA表达谱发现,高危组与低危组神经母细胞瘤的miRNA表达谱存在差异,如在高危组中,miR-17-92,miR-181,miR-21,miR-380-5p,miR-483-3p等明显上调,而miR-34a,miR-542-5p,let-7,miR-204等明显下调。

功能实验中亦证实多种miRNA在神经母细胞瘤细胞增殖、凋亡、分化、侵袭及转移中发挥着重要的作用。miR-483最早于人体新生儿的肝脏组织中发现,其定位于染色体11p15的IGF-2基因内含子内。其主要包括miR-483-3p及miR-483-5p两种,两者均在肿瘤中发挥着重要的作用。如miR-483-3p在肝癌中发挥着癌基因的作用,通过抑制其表达后可以明显的促进肿瘤细胞的凋亡,而miR-483-5p亦被证明在肾上腺皮质肿瘤中发挥着癌基因的作用。

通过qRT-PCR验证miR-483-3p在神经母细胞瘤组织标本及细胞中的表达情况,并进一步在细胞及动物实验中验证miR-483-3p对神经母细胞瘤的增殖、凋亡、侵袭及转移的影响,并通过计算机软件预测及分子生物学实验探索了miR-483-3p对神经母细胞瘤发挥作用的可能机制。

参考文献

[1]Upregulation of miR‐362‐3p Modulates Proliferation and Anchorage‐Independent Growth by Directly Targeting Tob2 in Hepatocellular Carcinoma[J].Hongxing Shen,Wenjuan Li,Yuan Tian,Peng Xu,Hui Wang,Jinxiang Zhang,Youjun Li.J.Cell.Biochem..2015(8)

[2]Inhibition of vascular endothelial growth factor by small interferingRNA upregulates differentiation,maturation and function of dendritic cells[J].Haiyan Wang,Luping Zhang,Shaoyan Zhang,Yannian Li.Experimental and Therapeutic Medicine.2015(1)

[3]Circulating miR-483-3p and miR-21 is highly expressed in plasma of pancreaticcancer[J].Makoto Abue,Misa Yokoyama,Rie Shibuya,Keiichi Tamai,Kazunori Yamaguchi,Ikuro Sato,Nobuyuki Tanaka,Shin Hamada,Tooru Shimosegawa,Kazuo Sugamura,Kennichi Satoh.International Journal of Oncology.2015(2)

[4]Downregulation of tumor suppressor menin by miR-421 promotes proliferation and migration of neuroblastoma[J].Yu Li,Wei Li,Jian-Guo Zhang,Hai-Yang Li,Yong-Ming Li.Tumor Biology.2014(10)

[5]吴凯.miR-483-3p对人神经母细胞瘤增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及作用机制研究[D].南方医科大学,2015.