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沙门氏菌显色培养基的应用

发布日期:2020/12/18 10:12:48

背景[1-3]

沙门氏菌显色培养基可用于沙门氏菌的分离和初步鉴别,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中沙门氏菌的快速检测。除伤寒沙门氏菌(在培养基上显无色)不能直接鉴定外,其它沙门氏菌显亮红色,大肠杆菌和大肠菌群显蓝色,枸橼酸杆菌显紫色,其它细菌显黄色或无色。

在食品污染中,主要的沙门氏菌为非伤寒沙门氏菌外的其它沙门氏菌,本培养基的特异性非常高,可达98%,是一种很理想的快速检测培养基。沙门氏菌包括2300种血清型,其中肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌大约占人类所有感染的一半。大多数感染可追溯到奶制品、禽类和肉制品,但沙门氏菌可在任何食物上生长。鸡肉、蛋及蛋制品尤其具有很高的风险。

沙门氏菌大多数菌种为兼性厌氧菌,不发酵乳糖,但可发酵葡萄糖,产酸产气,过氧化氢酶阳性,氧化酶阴性,革兰氏阴性,有动力。

用于区分和鉴别沙门氏菌的培养基是基于糖发酵及pH变化,蛋白裂解活性及硫化氢的产生。传统依靠硫化氢来鉴别的方法特异性不强,因为一些非沙门氏菌也产生硫化氢,如柠檬酸杆菌和奇异杆菌,因此还需要下游的鉴定试验。

用法:

称取本品13g加入200ml蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热1-2分钟。冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿。

操作步骤

1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;

2、取1ml样品液加入9ml RVS肉汤或其它选择性增菌肉汤中,36℃±1℃增菌培养24±2小时;

3、用3mm接种环取1环增菌液,划线接种到沙门氏菌显色培养基上,做2个平板;

4、36±1℃培养22-24h,沙门氏菌显紫色,大肠杆菌和大肠菌群显蓝色,其它细菌显黄色或无色;

5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36±1℃培养12-16小时,挑取单菌落做沙门氏菌全套生化试验和血清学试验(本公司有生化鉴定管套装10支x7种)。

应用[4][5]

用于食品中沙门氏菌检测方法分析及改进研究

结合国内外相关的沙门氏菌检测方法,建立起改进的沙门氏菌检测方法,通过对该方法进行有效性和准确性验证,能够与现行有效的国内国外标准检测方法达到同样的准确性和特异性,因此可以用于食品中沙门氏菌的检测。

新改进的方法将GB4789.4-2010沙门氏菌预增菌培养时间从818h变为8h,将标准中两种选择性增菌培养基TTB和SC变为SX2,将选择性分离培养基从BS和另外一种选择性分离培养基变为沙门氏菌显色培养基和XLD。改进的方法节省了12天检测周期,优化了检测流程,沙门氏菌显色培养基和XLD减少了沙门氏菌检测中常见杂菌的干扰,很多非沙门氏菌在这一步可以排除,减少了生化鉴定工作量。

参考文献

[1]Plants as alternative hosts for Salmonella[J].Adam Schikora,Ana V.Garcia,Heribert Hirt.Trends in Plant Science.2012(5)

[2]Rapid identification of Salmonella enterica serovars,Typhimurium,Choleraesuis,Infantis,Hadar,Enteritidis,Dublin and Gallinarum,by multiplex PCR[J].Masato Akiba,Masahiro Kusumoto,Taketoshi Iwata.Journal of Microbiological Methods.2011(1)

[3]A mutation in tdcA attenuates the virulence of Salmonella enterica serovar Typhimurium[J].Sangyong Lim,Minjeong Kim,Jeongjoon Choi,Sangryeol Ryu.Molecules and Cells.2010(5)

[4]A tdcA mutation reduces the invasive ability of Salmonella enterica serovar typhimurium[J].Minjeong Kim,Sangyong Lim,Dongho Kim,Hyon E.Choy,Sangryeol Ryu.Molecules and Cells.2009(4)

[5]严婷.食品中沙门氏菌检测方法分析及改进[D].上海交通大学,2017.

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