WHITE培养基图片的应用

背景^[1-3]

WHITE培养基图片主要用于培养植物生根、胚胎以及一般组织，主要由硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、磷酸盐等组成，其中硝酸钾工作浓度为80mg/L、硫酸镁工作浓度为720mg/L。该试剂特点是无机盐浓度较低。

WHITE培养基

组织培养是否成功，在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点，适合于不同的植物种类和接种材料。White培养基由于无机盐的数量比较低，更适合木本植物的组织培养。

使用方法：

用600ml蒸馏水溶解21.06g脱水培养基，用少量蒸馏水冲洗残余培养基粉末，轻轻搅动使培养基完全溶解。加入所有热稳定添加剂，用1N HCl/NaOH调节pH定容至1000ml。121ºC灭菌15 min，冷却至45ºC后，加入过滤除菌的热敏型添加剂分装到无菌容器中。

植物组织培养技术即植物无菌培养技术，又称离体培养技术，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、花、茎尖、果实等)、组织(如形成层、表皮、表层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体，在细菌和适宜的人工培养基及环境条件下，能够诱导出愈伤组织、不定芽、不定根、最后形成完整菌株的技术。

应用^[4][5]

用于雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook.f.）愈伤细胞悬浮培养生产雷公藤甲素研究

以雷公藤组织培养苗为材料，研究了愈伤组织诱导、悬浮细胞培养体系的建立、外源物对悬浮细胞生物学特征及次生代谢过程的影响。

方法：1．以雷公藤组培苗为诱导材料，研究雷公藤根、茎、叶三种外植体愈伤组织诱导率及雷公藤甲素质量分数。结果发现：在MS培养基上三种外植体愈伤组织诱导率：叶﹥茎﹥根；在五种不同组分培养基上对叶外植体诱导，其诱导率：MS﹥N6﹥B5﹥White﹥1/2MS；同时研究表明雷公藤叶外植体诱导愈伤组织pH范围为5.8-6.2；不同外植体诱导的愈伤组织雷公藤甲素质量分数分布规律：叶愈伤﹥根愈伤﹥茎愈伤。

2．对雷公藤叶愈伤组织进行悬浮培养，研究不同营养条件对雷公藤愈伤细胞生长及其雷公藤甲素含量的影响。结果表明：悬浮细胞在White培养基上增殖最快，而在MS培养基上生长最慢；White和MS培养基中悬浮细胞在第6d时雷公藤甲素含量最高，产量分别为70.14ug/g（DW）和40.77ug/g．而N6培养基中雷公藤甲素产量为6.34ug/g，出现在第9d；三组细胞培养悬浮液中的雷公藤甲素峰值产量分布规律则为：White（2.81mg/L）>N6（2.13mg/L）>MS（1.63mg/L）；同时培养基的pH值随细胞的生长而有波动现象。

3．以White液体培养基为培养条件，研究不同浓度水杨酸（SA）和氯化镧（Lacl3）对悬浮细胞生物学特征及产甲素过程的影响。SA和Lacl3均对雷公藤悬浮细胞PAL活性有不同程度的促进作用，两种诱导子对悬浮细胞胞内雷公藤甲素质量分数影响存在差异，两种诱导子各浓度处理下细胞内甲素峰值质量分数总体变异分布规律为：SA0.1mg/L95．99μg/g﹥Lacl340mg/L86.34μg/g﹥SA1.0mg/L71.02μg/g﹥Lacl360mg/L65.47μg/g﹥CK63.12μg/g﹥Lacl320mg/L58.23μg/g﹥SA10.0mg/L54.86μg/g。SA和Lacl3在合适浓度下有促进悬浮细胞向胞外释放次生代谢产物的能力，均能有效促进悬浮细胞胞外甲素的积累。

参考文献

[1]Elicitor signal transduction leading to production of plant secondary metabolites[J].Jian Zhao,Lawrence C.Davis,Robert Verpoorte.Biotechnology Advances.2005(4)

[2]Induction studies of methyl jasmonate and salicylic acid on taxane production in suspension cultures of Taxus chinensis var.mairei[J].Yan-Dong Wang,Ying-Jin Yuan,Jin-Chuan Wu.Biochemical Engineering Journal.2004(3)

[3]Improved cell growth and total flavonoids of Saussurea medusa on solid culture medium supplemented with rare earth elements[J].Xiaofan Yuan,Qian Wang,Bing Zhao,Yuchun Wang.Biotechnology Letters.2002(22)

[4]Accumulation of 2,5-dimethoxy-1,4-benzoquinone in suspension cultures of Panax ginseng by a fungal elicitor preparation and a yeast elicitor preparation[J].C.Kim,H.Im,H.Kim,H.Huh.Applied Microbiology and Biotechnology.2001(1-2)

[5]朱留刚.雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook.f.）愈伤细胞悬浮培养生产雷公藤甲素研究[D].福建农林大学,2012.