沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)的应用

背景^[1-3]

沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)用于沙门氏菌，志贺氏菌的选择性分离培养。沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)为肉粉色均一粉末，加入水中混悬均匀，灭菌后融化状态为半透明棕红色液体。接种沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、大肠埃希氏菌，菌落特征典型，生长良好；抑制金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌生长。

沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)

成分（g/L）：牛肉粉：5.0g；示月胨：5.0g；乳糖：10.0g；3号胆盐：8.5g；

枸橼酸钠：8.5g；硫代硫酸钠：8.5g；枸橼酸铁：1.0g；

中性红：0.025g；煌绿：0.00033g；琼脂：17.0g；

PH值：6.9-7.1。

用法：称取本品63.53克，溶解于1000ml蒸馏水中，加热煮至沸，不必高压蒸汽灭菌，冷至45-50℃倒成平板。

沙门菌属体型大多为（0.7～1.5）μm×（2.0～5.0）μm，其无芽胞，是无荚膜的革兰阴性直杆菌，除鸡沙门菌外都有周身鞭毛，能运动，多数有菌毛。营养要求不高，在普通琼脂培养上即能生长，在液体培养基中呈均匀混浊。在SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上35℃～37℃24h可形成直径约2～4mm的透明或半透明菌落，对胆盐耐受。产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心。

志贺菌属大小为0.5-0.7μmx2-3μm，无荚膜，无鞭毛，不形成芽胞，某些菌株有菌毛。在选择培养基上形成较小的半透明无色菌落。培养特性是需氧或兼性厌氧，液体培养基中呈浑浊生长，在普通琼脂平板和SS培养基上形成直径2mm左右的中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。

应用^[4][5]

用于鸡源沙门氏菌多重耐药的分子特征研究

研究鸡源沙门菌的药物敏感性特征、耐药基因检测及其流行性特征,以及1株耐四环素类抗生素的tetM基因的上下游环境。通过细菌分离鉴定、药敏试验、耐药基因检测,研究鸡源沙门菌多重耐药性;

通过ERIC-PCR研究产超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrumβ-lactamase,ESBLs）和AmpC酶的鸡源沙门菌之间的进化关系;通过接合试验、质粒提取、质粒不相容群分析、Overlapping PCR分析tetM基因的上下游环境。

1、采集疑似沙门菌感染的病死鸡的肝脏样品860份,参考食品卫生卫生学检验沙门菌检验（GB/T4789.4-2010）标准,具体通过SS琼脂、科玛嘉沙门菌显色培养基进行细菌初筛,再通过16S rRNA和特有侵袭基因（invA）扩增、测序进行鉴定,最终分离出156株鸡源沙门菌。

2、根据CLSI推荐的标准,采用微量肉汤稀释法对156株鸡源沙门菌分离株进行了13种常用抗菌药物的药物敏感性试验,结果显示,分离株对阿莫西林、土霉素、磺胺、多西环素的耐药率最高,分别为100%、99%、97%和87%;其次为氟苯尼考、恩诺沙星、庆大霉素,耐药率分别为57%、49%、49%;对头孢噻呋、头孢喹肟、喹乙醇、痢菌净较为敏感,耐药率为27%、26%、22%、15%;对阿米卡星和黏菌素最敏感,敏感率为97%、99%;并且分离株全部为多重耐药株,最低对3种抗菌药物耐药,最高对11种抗菌药物耐药,87%沙门菌对5种及其以上抗菌药物耐药,说明沙门菌多重耐药株较多。

参考文献

[1]Dissemination of IncFII plasmids carrying rmtB and qepA in Escherichia coli from pigs,farm workers and the environment[J].Y.Deng,Z.Zeng,S.Chen,L.He,Y.Liu,C.Wu,Z.Chen,Q.Yao,J.Hou,T.Yang,J.-H.Liu.Clinical Microbiology and Infection.2011(11)

[2]Epidemiology of extended spectrum beta-lactamase E.coli（CTX-M-15）on a commercial dairy farm[J].Eamon Watson,Sonja Jeckel,Lucy Snow,Rebecca Stubbs,Chris Teale,Heather Wearing,Robert Horton,Monique Toszeghy,Oliver Tearne,Joey Ellis-Iversen,Nick Coldham.Veterinary Microbiology.2011(3)

[3]IS Ecp1 element in association with bla CTX-M genes of E.coli that produce extended-spectrumβ-lactamase among the elderly in community settings[J].Su Fei Tian,Yun Zhuo Chu,Bai yi Chen,Hua Nian,Hong Shang.Enfermedades Infecciosas y Microbiologia Clinica.2011(10)

[4]Rapid identification of Salmonella enterica serovars,Typhimurium,Choleraesuis,Infantis,Hadar,Enteritidis,Dublin and Gallinarum,by multiplex PCR[J].Masato Akiba,Masahiro Kusumoto,Taketoshi Iwata.Journal of Microbiological Methods.2011(1)

[5]陈敏.鸡源沙门氏菌多重耐药的分子特征[D].河南农业大学,2018.