BOVINE FIBROBLAST GROWTH FACTOR-ACIDIC牛成纤维细胞生长因子(酸的应用

背景^[1-3]

BOVINE FIBROBLAST GROWTH FACTOR-ACIDIC牛成纤维细胞生长因子(酸是由Thomas等于1984年从牛脑中分离纯化得到的，它的等电点为5-7，呈酸性，故以之命名，是第二个被分离纯化的成纤维细胞生长因子家族成员，因此相对应的命名个碱性多肽为碱性成纤维细胞生长因子bFGF）。

成纤维细胞生长因子存在于机体多种组织中的一类多肽生长因子。其名称源于它对成纤维细胞的明显促分裂作用，主要以酸性和碱性两种形式存在。因它对肝素有很大的亲和力，故又称为肝素结合生长因子。它除对成纤维细胞的促分裂作用外，对平滑肌、软骨、角质细胞和周皮细胞都有刺激增殖作用。已经知道FGF由血管内皮细胞合成，储存于细胞基底膜和外基质中。

成纤维细胞生长因子（FGFs）是由约150-200氨基酸组成的多肽，以两种密切相关的形式存在，即碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)。

BOVINE FIBROBLAST GROWTH FACTOR-ACIDIC牛成纤维细胞生长因子

aFGF是哺乳动物组织中存在的一种正常而微量的物质，主要分布于脑、肾脏等器官或组织中，对来源于中胚层及神经外胚层的多种细胞均具有促分裂作用。因其在促进胚胎发育、器官形成、血管再生、溃疡愈合及创面修复等临床应用多方面作用明显而成为国内外研究的热点。

aFGF具有广泛的生物学效应，在临床上有重要的作用，既可用于治疗烧烫伤、溃疡、切口等创面愈合，又可治疗机体缺血损伤、心脑血管疾病、神经系统疾病、骨骼修复及眼晶状体再生等多种疾病，越来越受到人们的重视。nhaFGF改构体的研究大大拓宽了aFGF的应用范围，使aFGF更加广泛地应用于临床。

aFGF广泛的临床应用价值使其与其他多种药物相比展现出独特的优势，但由于受到活体试验和伦理学的限制，人们对aFGF多种活性的作用机制并不是十分清楚，还需要研究者通过大量的动物验作进一步完善。今后还应继续对aFGF的结构组成、功能活性和信号转导等基础领域进行深入研究，为aFGF的实际应用提供理论基础和试验依据，以期在临床应用中使aFGF的作用得到更大的发挥，使aFGF具有更为广阔的应用前景。

应用^[4][5]

用于VEGF、bFGF浓度梯度对猪血管内皮细胞、成纤维细胞增殖移行的影响研究

利用细胞生长因子浓度梯度诱导技术,探讨成纤维细胞、血管内皮细胞能否在生长因子浓度梯度诱导下快速地由低浓度向高浓度增殖移行,为加速慢性创面的修复提供一定的理论基础。

方法1.体外培养猪血管内皮细胞和成纤维细胞。

2. 用MTT法及细胞划痕实验检测不同浓度VEGF对血管内皮细胞增殖和移行的影响及不同浓度b FGF对成纤维细胞增殖和移行的影响。

3. 以浸泡法将VEGF和b FGF分别加载于胶原支架,用ELISA法通过标准曲线计算VEGF和b FGF于胶原支架的结合率和缓释性。

4. 筛选出在各时间点增殖和移行活性均有差异的不同浓度的VEGF或b FGF加载于胶原支架构成浓度梯度。

5. 血管内皮细胞与加载VEGF浓度梯度的圆形胶原支架共同培养,通过MTT法和测量细胞距中心点距离的差值检测血管内皮细胞增殖和迁移活力.

6. 成纤维细胞与加载b FGF浓度梯度的圆形胶原支架共同培养,通过MTT法和测量细胞距中心点距离的差值检测成纤维细胞增殖和迁移活力。

结果1.在不同浓度VEGF刺激下,血管内皮细胞的增殖和迁移活性均受到影响,对两组数据分别进行单因素方差分析,筛选出5ng/ml,25ng/ml,100ng/ml三组,三组组间在各时间点增殖和迁移活力都有显著差异（P<0.05）。

2. 在不同浓度b FGF刺激下,成纤维细胞的增殖和迁移活性均受到影响,对两组数据分别进行单因素方差分析,筛选出10ng/ml,50ng/ml,100ng/ml三组,三组组间在各时间点增殖和迁移活力都有显著差异（P<0.05）。

3. VEGF与胶原支架结合率为42.35%,b FGF与胶原膜片结合率为38.23%,且有一定的缓释性。

4. VEGF浓度梯度组（5ng/ml,25ng/ml,100ng/ml）与VEGF单一浓度组相比较,对血管内皮细胞的增殖活性没有显著影响,而对血管内皮细胞的迁移活性有显著影响（P<0.05）。

5.b FGF浓度梯度组（10ng/ml,50ng/ml,100ng/ml）与b FGF单一浓度组相比较,对成纤维细胞的增殖活性没有显著影响,而对成纤维细胞的迁移活性有显著影响（P<0.05）。

参考文献

[1]Bladder Regeneration by Collagen Scaffolds With Collagen Binding Human Basic Fibroblast Growth Factor[J].Wei Chen,Chunying Shi,Shanhong Yi,Bing Chen,Weiwei Zhang,Zhenqiang Fang,Zhanliang Wei,Shaoxia Jiang,Xianchang Sun,Xianglin Hou,Zhifeng Xiao,Gang Ye,Jianwu Dai.The Journal of Urology.2010(6)

[2]Acceleration of diabetic wound healing by collagen-binding vascular endothelial growth factor in diabetic rat model[J].Xin Yan,Bing Chen,Yue Lin,Yunjian Li,Zhifeng Xiao,Xianglin Hou,Qian Tan,Jianwu Dai.Diabetes Research and Clinical Practice.2010(1)

[3]Accelerated wound closure of pressure ulcers in aged mice by chitosan scaffolds with and without bFGF[J].Chan J.Park,Sherrie G.Clark,Carol A.Lichtensteiger,Russell D.Jamison,Amy J.Wagoner Johnson.Acta Biomaterialia.2009(6)

[4]Preincubation With bFGF but Not Sodium Ascorbate Improves Efficiency of Autologous Transplantation of Muscle-derived Cells Into Urethral Wall[J].Anna Burdzińska,Urszula Bartoszuk,Arkadiusz Orzechowski.Urology.2009(4)

[5]吕经纬.VEGF、bFGF浓度梯度对猪血管内皮细胞、成纤维细胞增殖移行的影响[D].南京医科大学,2015.