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3,5-二硝基水杨酸的作用与配制

发布日期:2023/12/13 9:30:14

3,5-二硝基水杨酸(简称DNS)是一种芳香酸,与还原糖等还原性物质反应生成3-氨基-5-硝基水杨酸,后者在540 nm波长处有强烈的吸收峰。DNS最早用于检测尿液中的还原性物质;如今人们用它测定各种还原糖的浓度,如血液中的糖类等,主要用于测定α-淀粉酶。因为它的反应没有特异性,故一般认为用酶检测更佳。

3,5-二硝基水杨酸

性质

3,5-二硝基水杨酸为黄色针状或盘状晶体,可溶于乙醇、乙醚、苯。

作用

3,5-二硝基水杨酸是一种强有机酸,是水杨酸的二硝化衍生物。用作淀粉检测试剂。它与淀粉中的直链淀粉和支链淀粉反应,形成蓝色或紫色,该反应可以使用滴定量热法或复合酶溶液来测量。它还用于分析方法,通过测量硝基化合物的质子含量来确定硝基化合物的纯度。3,5-二硝基水杨酸还可通过与羧酸形成分子间氢键来检测羧酸。它用于比色测定还原糖,并通过定量酶促释放的还原糖来分析糖苷酶(糖苷水解酶)活性。

DNS试剂配制

(1)以称取3,5-二硝基水杨酸(C7H4N2O7)6.3 g,氢氧化钠 21.0 g充分溶解于500 ml蒸馏水中(水先煮沸10分钟后冷却)

(2)加入 酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)182.0g,苯酚(在50℃水中融化) 5.0g, 偏重亚硫酸钠(NaS2O5)5.0g,搅拌至全溶,定容至1000 ml。

(3)充分溶解后盛于棕色瓶中,放置10天后便可使用。平时盛一小瓶放在外面使用,其它储于冰箱中。此溶液每月配制一次。

注意:DNS一定要在配制结束后立即转移到小棕色瓶中,同时,使用过程中尽量减少与空气接触。

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