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PUMA兔多克隆抗体

发布日期:2020/2/1 11:46:39

背景[1-7]

PUMA Rabbit Polyclonal Antibody(PUMA兔多克隆抗体)用PUMA作为抗原刺激兔机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白。PUMA Rabbit Polyclonal Antibody是通过分子生物学方法构建了重组PUMA的表达载体,并诱导实现PUMA抗体的大量表达。该重组蛋白以可溶性形式存在,经亲和柱纯化后对家兔进行免疫,得到PUMA抗体(兔多抗)。

PUMA刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。一般而言,抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体,由多个B淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体。

多抗一般制备流程:完全抗原的准备→兔子的免疫→效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。PUMA的表达受肿瘤抑制基因p53的调节。PUMA参与由多种信号诱导的p53依赖性和非依赖性细胞凋亡,并且受转录因子调节,而不是通过翻译后修饰。活化后,用PUMA抗凋亡相互作用的Bcl-2家族成员,从而释放Bax蛋白和/或Bak的其然后能够发送信号的细胞凋亡的线粒体。继线粒体功能障碍时,胱天蛋白酶级联被激活,最终导致细胞死亡。

生化研究表明PUMA与抗凋亡Bcl-2家族成员如Bcl-xL,Bcl-2,Mcl-1,Bcl-w和A1相互作用,抑制它们与促凋亡分子Bax和Bak的相互作用。当它们的抑制被解除时,它们导致Bax的易位和线粒体功能障碍的激活,导致线粒体凋亡蛋白细胞色素c,SMAC和凋亡诱导因子(AIF)的释放,导致胱天蛋白酶活化和细胞死亡。因为PUMA对结合Bcl-2家族成员具有高亲和力,另一个假设是PUMA直接激活Bax和/或Bak,并且通过Bax多聚化触发线粒体易位并且其诱导细胞凋亡。然而,各种研究表明,PUMA不依赖于与Bax/Bak的直接相互作用来诱导细胞凋亡。

应用[8]

PUMA兔多克隆抗体可用于细胞凋亡通路研究:

PUMA、Bim是Bcl-2蛋白家族BH3-only亚家族中重要的促凋亡基因,在多种因素诱导的细胞凋亡启动和多种疾病的发生过程中都发挥着重要的作用。目前尚没有PUMA、Bim在过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞系HLEC-B3凋亡中作用的相关报道,探讨PUMA、Bim对人晶状体上皮细胞凋亡的作用及其诱导表达的途径和机制,进一步阐明白内障发病机制,可以为基因治疗提供前期的理论依据。

JNK信号通路参与了多种生理和病理过程,激活后的JNK能激活包括转录因子在内的多种效应蛋白,产生生物学效应。C-jun是JNK的主要下游因子,编码的蛋白产物可以构成转录因子AP-1,转录因子AP-1是细胞内JNK/SAPK作用的重要目标。在活化条件下,JNK磷酸化c-jun,并增加其转录活性,c-jun蛋白可以根据不同的细胞类型决定诱导细胞凋亡或者抑制细胞凋亡。

参考文献

[1]Role of Ultraviolet Irradiation and Oxidative Stress in Cataract Formation—Medical Prevention by Nutritional Antioxidants and Metabolic Agonists[J].Shambhu D Varma,Svitlana Kovtun,Kavita R Hegde.Eye&Contact Lens:Science&Clinical Practice.2011(4)

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[3]MAP kinase pathways in UV-induced apoptosis of retinal pigment epithelium ARPE19 cells[J].Raphal Roduit,Daniel F.Schorderet.Apoptosis.2008(3)

[4]ER Stress Triggers Apoptosis by Activating BH3-Only Protein Bim[J].Hamsa Puthalakath,Lorraine A.O’Reilly,Priscilla Gunn,Lily Lee,Priscilla N.Kelly,Nicholas D.Huntington,Peter D.Hughes,Ewa M.Michalak,Jennifer McKimm-Breschkin,Noburo Motoyama,Tomomi Gotoh,Shizuo Akira,Philippe Bouillet,Andreas Strasser.Cell.2007(7)

[5]Arsenic trioxide initiates ER stress responses,perturbs calcium signalling and promotes apoptosis in human lens epithelial cells[J].Hong Zhang,George Duncan,Lixin Wang,Ping Liu,Hao Cui,John R.Reddan,Bao-Feng Yang,I.Michael Wormstone.Experimental Eye Research.2007(6)

[6]Regulation of cell death and survival pathways in experimental glaucoma[J].Hani Levkovitch-Verbin,Noga Harizman,Rima Dardik,Yael Nisgav,Shelly Vander,Shlomo Melamed.Experimental Eye Research.2007(2)

[7]Important role of apoptosis signal-regulating kinase 1 in ischemic acute kidney injury[J].Yoshio Terada,Seiji Inoshita,Hitoshi Kuwana,Takahiko Kobayashi,Tomokazu Okado,Hidenori Ichijo,Sei Sasaki.Biochemical and Biophysical Research Communications.2007(4)

[8]杨鑫.JNK/c-Jun通路及其靶基因Bim与PUMA在氧化应激诱导的人晶状体上皮细胞凋亡中的实验研究[D].郑州大学,2012.

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