醚菊酯的应用、毒性以及抗原抗体制备

介绍

醚菊酯(etofenprox)称为类似拟除虫菊酯类的杀虫剂，化学式为C25H28O3，白色结晶体，其结构中无菊酸但空间结构和拟除虫菊酯有相似之处，但事实上醚菊酯不属于拟虫菊酯类农药，而是属于醚类，但是兼具了拟虫菊酯类农药的优点。

醚菊酯

应用

醚菊酯具有杀虫杀虫活性高、击倒速度快的特点。适用于防治水稻、蔬菜、棉花上，对同翅目飞虱科特效，同时对鳞翅目、半翅目、直翅目、鞘翅目、双翅目和等翅目等多种害虫也有很好的效果，尤其对水稻稻飞虱的防治效果显著[3]。

毒性

醚菊酯作为一种低毒安全的杀虫剂，也是国家禁止高毒类农药在水稻上应用后的指定产品，是唯一允许在水稻上登记的拟虫菊酯类农药，其速效性和持效性优于吡蚜酮和烯啶虫胺。自2009年起，醚菊酯已经被全国农技推广中心列入重点推广产品，安徽、江苏、湖北、湖南、广西等地植保站已经将药剂列入植保站重点推广品种。综合评价醚菊酯的毒性，属低毒杀虫剂，但对鱼和蜜蜂高毒，存在一定的环境风险。

醚菊酯半抗原的合成

在动物免疫系统中，要获得抗体，抗原必须具备免疫原性。醚菊酯作为小分子化合物，其不具备天然免疫原性，也就是说不能刺激动物免疫系统产生抗体。我们需要人为将其进行结构改造，并与蛋白偶联，使其具备免疫原性。蛋白偶联方法中的主要活泼基团有羧基、氨基、羟基、巯基，本发明中在醚菊酯结构上引入了羧酸基团，使其能与蛋白缩合偶联[1-2]。

醚菊酯半抗原合成方法：称取2g醚菊酯溶于15倍体积的MeOH水溶液，加入1.5倍摩尔当量的HNO3，搅拌条件下升温至80℃，反应得到硝基醚菊酯。加入适量Fe和HCl进行催化反应，得到氨基醚菊酯。进一步将1.5倍当量的酰氯戊酸甲酯，搅拌反应，得到醚菊酯‑酰胺戊酸甲酯。再加入1.5倍当量的NaOH，水解反应2h得到醚菊酯‑酰胺戊酸，冷却至10℃，抽滤，得到的固体样品用1,4‑二氧六环重结晶，干燥后得到醚菊酯半抗原固体0.532g，纯度为96.2％。

醚菊酯人工抗原的制备

称0.004mmoL醚菊酯半抗原溶于0.5mL DMF中，加入0.012mmoL N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)，搅拌反应15min，再加入含0.006mmoL 1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，室温搅拌反应过夜。反应液即为醚菊酯半抗原活化液。用0.01M碳酸缓冲液(pH 9.0)配置5mg/mL的KLH溶液，室温搅拌条件下逐滴加入上述HaptenA活化液，再改为缓慢磁力搅拌反应3.5h。将反应溶液装入预处理的透析袋中，用100倍体积0.01M磷酸缓冲液(PBS)透析3次，每隔6h换液一次。透析结束后将透析液取出，混匀后分装至低吸附性的离心管中，得到醚菊酯免疫原MJZ‑KLH，并于‑20℃条件下保存。

称0.01mmoL醚菊酯半抗原溶于0.5mL DMF中。搅拌下加入0.02mmoL羰基二咪唑，室温搅拌反应3h，得到醚菊酯半抗原活化液。用0.01M碳酸缓冲液(pH 9.0)配置10mg/mL的BSA溶液，室温搅拌条件下逐滴加入上述半抗原活化液，继续搅拌反应3h，将反应溶液装入预处理的透析袋中，用100倍体积0.01M PBS透析3次，每隔6h换液一次。透析结束后将透析液取出，混匀后分装至低吸附性的离心管中，得到醚菊酯包被原MJZ‑OVA溶液，并于‑20℃条件下保存。

储存

1.醚菊酯应贮存在阴凉、干燥处。避免与氧化剂和酸性物质混储混运。远离火种、热源。

2. 运输过程中要确保容器不泄漏、破损，高温季节应早晚运输，避开中午高温时段。

3. 配备相应品种和数量的消防器材。

4. 禁止使用易产生火花的机械设备和工具。

5. 储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

参考文献

[1]赵颖. 醚菊酯人工半抗原、人工抗原、抗体及其应用[P]. 浙江省: CN116675619A, 2023-09-01.

[2]吕俊海,杨静,修成奎. 农药醚菊酯荧光定量免疫层析检测试纸及其应用[P]. 北京市: CN111781348B, 2023-03-24.

[3]杨飞,王颖,邓惠敏等. 一种植物源性食物中醚菊酯的检测方法、植物源性食物样品的前处理方法[P]. 河南省: CN115453020A, 2022-12-09.