分析染色剂——吉氏色素

概述

吉氏色素的分子式为C₁₄H₁₄ClN₃S，分子量为291.799，蓝紫至黑紫色粉末，中性染料。根据有关的实验验证，吉氏色素的熔点为300-301℃，沸点442.8°C at 760 mmHg，可溶于等量甲醇和甘油中，溶液呈蓝色。一般来说，吉氏色素主要用作原生物染色剂，用于血液涂膜法检查疟原虫及锥虫，也可作致病性螺旋体染色，血球及过氧化酶的染色等。

染液制备

以吉氏色素为基底的瑞氏吉姆萨复合染液的制备方法属于医学检测技术领域，相关复合染液包括如下组分：瑞氏染料，吉氏色素染料，甲醇，甘油，表面活性剂。该复合染液制备工艺简单，易操作，有利于企业大批量生产。在制备该复合染液的过程中加入表面活性剂，能够加速染料溶解以及染色过程中染料小分子进入细胞的速度，因此该染色液成熟所需时间短，只需放置2d就可使用，使用该复合染液进行染色时，只需染2-3min便能达到良好的染色效果，很好地实现了在保证对血细胞染色清晰，胞质，颗粒，核等着色效果好的前提下，缩短染色时间，进而缩短诊断时间，配合仪器使用可以提高染片效率的目的[1]。

用途

金属测定

在硫酸介质中，高碘酸钾氧化吉 氏色素变色，而钌(Ⅲ)可催化高碘酸钾氧化吉氏色素褪色，由此可以建立测定痕量钌的催化光度法。钌在0.002~0.008μg/mL范围内与催化反应速率 有良好的线性关系，检出限为1.88×10-10g/mL。该催化反应对钌(Ⅲ)是一级反应，其表观活化能为12.44 kJ/mol。试验了40多种共存离子的影响，大多数的常见离子不干扰。该方法可用于贵金属精矿中钌的测定，测定值与推荐值一致，相对标准偏差(RSD)为 2.2%~2.6%，加标平均回收率为98%~99%(n=6)[2]

细胞分析

为研究鸡自然杀伤(NK)细胞，实验采用冷胰酶消化法消化14日胚龄鸡胚脾脏组织，分离收 获鸡胚脾脏淋巴细胞，在含有重组鸡白介素-2和条件培养基的IMDM培养液中培养48 h，收获悬浮细胞，暂时命名为TCR0细胞(即鸡NK细胞)。流式前向角和侧向角分析显示培养的TCR0细胞中85.1%的细胞大小均一，颗粒度一致。吉氏色素染料染色结果表明，TCR0细胞内一侧含有嗜酸性大颗粒，符合鸡NK细胞的形态特征。流式细胞术单克隆抗体吉氏色素染色结果显示，TCR0细胞中，97.4 %高表达MHCⅠ类分子，30.8 %低表达CD8a，不表达T细胞表面标记CD3和B细胞表面标记CD4和Bu-1，符合鸡NK细胞表面标记特点。该实验是国内成功分离并纯化鸡NK细胞的 首次报道[3]。

参考文献

[1]周永杨,张娟,王丽钧.一种瑞氏-吉姆萨复合染液及其制备方法:CN201910162711.1[P].CN109971212A.

[2]宋学省.钌(Ⅲ)-吉氏色素-高碘酸钾体系催化动力学光度法测定痕量钌[J].冶金分析, 2010(4):3.DOI:10.3969/j.issn.1000-7571.2010.04.014.

[3]杨超,张晓娜,张园华,等.鸡自然杀伤细胞的分离与免疫表型分析[J].中国预防兽医学报, 2014, 36(3):3.DOI:10.3969/j.issn.1008-0589.2014.03.16.