CIITA抗体的应用

背景^[1-3]

CIITA抗体是针对CIITA（Class II,Major Histocompatibility Complex,Transactivator）蛋白的特异性抗体。CIITA蛋白在主要组织相容性复合体（MHC）II类基因的表达调控中起到关键作用，特别是在免疫应答和自身免疫疾病中。

CIITA抗体

CIITA抗体的制备过程可能涉及以下步骤：

1.抗原制备：首先需要制备CIITA蛋白或其特定的抗原片段。这个片段应该包含CIITA的免疫原性区域，以便能够引发免疫反应。

2.免疫动物：将CIITA抗原注射到免疫原性动物（如兔子、小鼠或大鼠）中，以激发其免疫系统产生抗体。这通常通过多次注射（称为加强注射）来完成，以增强免疫反应。

3.收集血清：在免疫接种后，收集动物的血液样本，并从中分离出血清。血清中含有对抗原（即CIITA）的特异性抗体。

4.纯化抗体：使用各种色谱技术和亲和纯化方法（如蛋白质A/G亲和色谱、抗原亲和色谱等）从血清中分离和纯化CIITA抗体。

CIITA抗体在科研实验中有广泛的应用，如用于检测CIITA蛋白在细胞和组织中的表达水平，以及研究CIITA在免疫应答和自身免疫疾病中的作用机制。此外，CIITA抗体还可以用于免疫组化、蛋白质印迹（Western Blotting）等实验技术中。

CIITA抗体主要与两种疾病相关：原发性胆汁性胆管炎（PBC）和自身免疫性肝炎（AIH）。PBC是一种慢性疾病，主要影响肝脏的小胆管，而AIH则是一种影响肝脏的炎症性疾病。这两种疾病都可能导致肝脏损伤和功能下降。

检测CIITA抗体可以帮助医生诊断这些疾病，尤其是在其他标准检测如抗线粒体抗体（AMA）和抗核抗体（ANA）结果不明确时。然而，CIITA抗体测试并不是在所有情况下都是必需的，其结果需要结合病人的临床症状和其他实验室检查结果一起综合评估。

应用^[4][5]

CIITA抗体可以用于II类主要组织相容性抗原在肺纤维化的表达及其机制探讨

在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型上,观察肺组织MHC II类分子及其上游调控因子CIITA表达水平的变化,临床实验观察HLA-DR在特发性肺纤维化的表达,探讨MHC II类分子在肺纤维化发病中可能的病理生理意义。

方法:(1)雄性Wistar大鼠20只,随机分为对照组、肺纤维化组(经气管内注入BLMA5 5mg/kg),分别于造模后第7天、28天取肺组织行HE染色、Masson染色,并依据szapiel方法对肺部病变进行半定量评分;生化方法检测肺组织羟脯氨酸含量;(2)CIITA抗体免疫组化染色观察大鼠肺组织MHC II类分子表达,实时定量PCR技术测定肺组织总CIITA及I型、III型、IV型CIITAmRNA和TGF-β1mRNA表达;(3)ELISA法检测大鼠肺泡灌洗液中IFN-γ及IL-4水平变化;(4)收集肺活检的特发性肺纤维化(IPF)患者肺组织石蜡标本10例,免疫组化染色观察肺组织HLA-DR的表达情况。

CIITA抗体结果:(1)气管内给予博莱霉素后第7天及第28天,大鼠肺组织MHC II阳性细胞明显增多(P<0.05,P<0.01),第28天较第7天增多(P<0.05);(2)第7天时,纤维化组大鼠肺组织总CIITA较对照组升高170.4%(P<0.05),I型CIITA较对照组升高258.8%(P<0.05),IV型CIITA较对照组降低87.2%(P<0.01);第28天时,纤维化组大鼠肺组织总CIITA较对照组升高98.6%(P<0.05),I型CIITA较对照组升高137.1%(P<0.05),IV型CIITA仍较对照组低,但差异无统计学意义;纤维化组肺组织IV型CIITA在第28天时较第7天时升高667.3%(P<0.01);(3)纤维化组肺组织第7天TGF-β1mRNA水平升高,达对照组的8倍多(P<0.01),第28天TGF-β1mRNA较第7天略有下降,但仍显著高于对照组(P<0.01),约为对照组的4倍;(4)纤维化组大鼠第7天及第28天BALF中IFN-γ含量均较对照组下降(均P<0.01),而同时期BALF中IL-4含量均较对照组升高(均P<0.01);(5)IPF肺组织细支气管肺泡上皮HLA-DR表达上调,与对照组比较差异具有统计学意义(Z=-3.002,P=0.001)。

参考文献

[1]Complex Regulation of Pulmonary Inflammation and Fibrosis by CCL18[J].Kerill Pochetuhen;;Irina G.Luzina;;Virginia Lockatell;;Jung Choi;;Nevins W.Todd;;Sergei P.Atamas.The American Journal of Pathology,2007(2)

[2]Epigenetic regulation of MHC-II and CIITA genes[J].Kenneth L.Wright;;Jenny P-Y.Ting.Trends in Immunology,2006(9)

[3]Diverse mechanisms employed by Toxoplasma gondii to inhibit IFN-γ-induced major histocompatibility complex class II gene expression[J]..Microbes and Infection,2006(8)

[4]Idiopathic Pulmonary Fibrosis Related to Endothelial Injury and Antiendothelial Cell Antibodies[J].Cynthia M.Magro;;W.James Waldman;;Deborah A.Knight;;James N.Allen;;Tibor Nadasdy;;Gwyn E.Frambach;;Patrick Ross;;Clay B.Marsh.Human Immunology,2006(4)

[5]倪莲芳.II类主要组织相容性抗原在肺纤维化的表达及其机制探讨[D].北京大学,2009.