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对人子宫平滑肌细胞的相关研究

发布日期:2020/2/20 8:45:53

背景及概述[1]

平滑肌细胞又叫平滑肌纤维,系构成平滑肌的纤维状长细胞。平滑肌细胞多聚集成束,细胞轮廓不清,需用适当浓度的酸(碱)溶液将其分离,方可获得外形完整的肌细胞。细胞内只有1个细胞核,呈椭圆形或长杆状,位于细胞中段最宽的部分,长度与纵轴平行,核染色质为纤细网状,可见2个以上核仁。每个平滑肌细胞周围有少量纤细的胶质纤维、弹力纤维及网状纤维,包绕于肌膜的表面。平滑肌细胞可随环境的改变伸长或缩短,有很大的弹性和韧力。人子宫平滑肌细胞分离自正常人子宫平滑肌组织,其主要功能:(1)子宫平滑肌能保持子宫的基本形态,在孕期能化的扩张子宫容积,保证胎儿孕育环境。(2)平滑肌细胞有收缩舒张能力,在生产时能形成生理性的缩腹环,推动胎儿向下移动,辅助生产。人子宫平滑肌细胞均来自新鲜组织,采用人子宫平滑肌细胞培养试剂盒培养。

体外培养[2]

采用胶原酶消化法培养人子宫平滑肌细胞,可获得95%以上具有正常代谢活性的平滑肌细胞,对存活的子宫平滑肌细胞经倒置显微镜观察和免疫组化染色对其进行鉴别。结果平滑肌细胞接种4h后开始贴壁,6~7d汇合成片,所培养的细胞在倒置显微镜下呈梭形和典型“峰-谷”样生长,α-Actin免疫组化染色强阳性。结论采用本法体外培养的人子宫平滑肌细胞生长良好,纯度高,可用于人子宫平滑肌细胞生理和病理等方面的研究。

相关研究[4]

有实验研究缩宫素(OT)、前列腺素干预对原代培养的子宫平滑肌细胞缩宫素受体(OTR)表达的影响。分别用OT、前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2alpha(PGF2alpha)干预原代人子宫平滑肌细,检测细胞匀浆中的OTRmRNA、蛋白的表达。结果显示OT干预前后OTR的表达无显著改变。PGE2、PGF2alpha干预组较未干预组OTR的表达明显增加。PGE2与PGF2alpha共干预组较未干预组及PGE2、PGF2alpha单独干预组OTR的表达明显增加。因此OT不能增加人子宫平滑肌细胞上OTR的表达,PGE2、PGF2alpha可增加人子宫平滑肌细胞中OTR的表达,且有协同作用。

此外,还有实验探讨人类促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对人子宫平滑肌细胞间隙连接蛋白43磷酸化水平(P-Cx43)以及其对子宫平滑肌细胞间隙连接通道(GJIC)功能的影响。方法是原代培养人未孕子宫平滑肌细胞,给予不同浓度的CRH(0,5.85,58.5,585,5850pmol/L)进行干预,采用Western印迹分别定量检测CRH各浓度组中子宫平滑肌细胞P-Cx43与非磷酸化Cx43蛋白(NP-Cx43)的表达;细胞划痕实验检测CRH各浓度组中GJIC的变化。结果:CRH各干预组子宫平滑肌细胞中P-Cx43蛋白的表达明显高于对照组,随着CRH干预浓度的递增,呈剂量依赖趋势,各组之间差异有统计学意义(P<0.01);而对照组和干预组之间NP-Cx43蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05);CRH干预后各浓度组荧光黄染料在子宫平滑肌细胞中传输的细胞数明显高于对照组,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。同时,随着CRH干预浓度的递增,荧光黄染料传输至最远细胞级所需要的时间呈剂量依赖趋势,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。

主要参考资料

[1] 新编实用医学词典

[2] 人子宫平滑肌细胞体外培养

[3] 人子宫平滑肌细胞的原代培养及应用

[4] CRH对人子宫平滑肌细胞Cx43磷酸化水平及细胞间隙连接通讯的

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