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马血清

发布日期:2020/2/23 10:23:04

背景[1-7]

马血清采自健康马血液为原料,封闭系统内无菌采血,微孔过滤而成,性状为澄清液体,无噬菌体、超低内毒素,无溶血无异物无细菌真菌支原体霉形体衣原体等,促细胞生长繁殖效果极佳,适用于细胞、组织器官培养、细胞株保藏、单抗研制,是医院、科研院校、动物疫苗、生物制药厂家重要培养基之一。细胞在单纯的培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些营养物质和生长因子才能是细胞得以生长并维持生长状态。

基础培养基常常要添加血清,血清终浓度多为5-20%。特殊用途的血清来源需用经验确定。广泛应用的血清种类有马血清与牛血清,胎牛血清中富含有丝分裂因子,常选其做增殖细胞用的血清,也用于细胞系和原代培养。而马血清常常用来做有丝分裂后的神经元培养。

然而,很多人也将胎牛血清用于神经元培养,也有人用马血清来培养胶质细胞。马血清纯天然制品,含有丰富的蛋白,可以替换FBS用于大多数哺乳动物细胞的培养,不宜用于昆虫细胞的培养。马血清含有更多的生长因子,尤其适用于造血干细胞的培养。另外马血清还可以用于原代神经细胞的培养和支原体的培养。

马血清还可以用于异核体细胞的形成、绵羊红细胞的体外抗体反应以及肌肉细胞的诱导分化等。

细胞培养中血清的作用

1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物.

2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力.

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用.

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源.

5.起酸碱度缓冲液作用.

应用[8][9]

马血清可用于动物疾病模型的研究:

在马血清及不同结构皮质类固醇激素单独或联合应用后对兔股骨头坏死所产生的影响实验中取健康新西兰雄性大白兔60只,随机分成6组,每组10只。单纯马血清组:间隔2周耳缘静脉注射马血清,每次10mg/kg。地塞米松组:臀肌注射地塞米松2.5mg/kg,2次/周;甲基氢化泼尼松组:臀肌注射甲基氢化泼尼松10mg/kg,2次/周。马血清加甲基强的松龙组:同马血清组注射马血清,第2次注射2周后,臀肌注射甲基强的松龙10mg/kg,2次/周。马血清加地塞米松组:同马血清组注射马血清,第2次注射2周后,臀肌注射地塞米松2.5mg/kg,2次/周。正常对照组,臀肌注生理盐水,2次/周。②8,12,18周,取各组家兔双侧股骨头组织病理学检测。

结果:①各组家兔双侧股骨头组织病理学特征:单一处理的兔子中,骨坏死常伴有临近修复过程,复合处理的很少能观察到修复反应,股骨头坏死发生率明显。②组织学改变:用药12周可见大量空骨陷窝,髓内脂肪细胞增大,坏死骨小梁出现断裂,出现死骨片,髓内脂肪细胞增大并融合成片;18周时骨小梁纤细、断裂,间距增大,结构模糊,血管数量明显减少,骨的近端或远端含有骨坏死。③各组股骨头坏死率的比较:马血清组占30%(6/20);地塞米松组占50%(10/20);甲基氢化泼尼松组占65%(13/20);马血清加甲基强的松龙组占75%(15/20);马血清加地塞米松组占70%(14/20);正常对照组为0;马血清加甲基强的松龙组、马血清加地塞米松组两组与其他各组相比较差异有显著性意义(P<0.01)。

结论:马血清与甲基氢化泼尼松或与地塞米松合用时造成兔股骨头坏死率明显超过其他种类药物导致的骨坏死率。

参考文献

[1]Expression of 11β-HSD in steroid-induced avascular necrosis of the femoralhead[J] . Lin Wang,Deng-Ke Luo,Zhen-Yu Pan.  Molecular Medicine Reports . 2013 (5)

[2]Ibandronate for prevention and treatment of glucocorticoid-induced osteoporosis in rabbits[J] . Kun-juan Zhang,Jian Zhang,Ze-kun Kang,Xiao-mei Xue,Jing-fen Kang,Yan-wei Li,Hai-ning Dong,Dong-gang Liu.  Rheumatology International . 2012 (11)

[3]Clinical analysis of osteonecrosis of the femoral head induced by steroids[J] . Feng‐chaoZhao,Zi‐rongLi,Kai‐jinGuo.  Orthopaedic Surgery . 2012 (1)

[4]Effect of pentoxifylline on histopathological changes in steroid-induced osteonecrosis of femoral head: experimental study in chicken[J] . H. Erken,Onder Ofluoglu,Mustafa Aktas,Cumhur Topal,Muzaffer Yildiz.  International Orthopaedics . 2012 (7)

[5]Establishment of a steroid-induced osteonecrosis animal model in bipedal emus[J] . Zhong Liu,Ge Zhang,Chiwai Man,Jiang Peng,Ming Lei,Jun Xia,Demiing Xiao,Xinhui Xie,Xinluan Wang,Yixin He,Ling Qin.  Bone . 2010

[6]Pathophysiology and natural history of avascular necrosis of bone[J] . Pierre Lafforgue.  Joint Bone Spine . 2006 (5)

[7]Oxidative stress and vascular permeability in steroid-induced osteonecrosis model[J] . Toru Ichiseki,Tadami Matsumoto,Mitsuru Nishino,Ayumi Kaneuji,Shogo Katsuda.  Journal of Orthopaedic Science . 2004 (5)

[8]Inducible osteonecrosis in a rabbit serum sickness model: Deposition of immune complexes in bone marrow[J] . K. Nakata,K. Masuhara,N. Nakamura,T. Shibuya,N. Sugano,M. Matsui,T. Ochi,K. Ohzono.  Bone . 1996 (6)

[9]曹良权,杜斌,孙光权,刘锌,陈国庆,顾磊,刘兵.不同剂量糖皮质激素联合马血清构建激素诱导型股骨头缺血性坏死兔模型[J].中国组织工程研究,2017,21(08):1229-1235.

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