人线粒体核糖体蛋白L41(MRPL41)ELISA试剂盒

背景^[1-7]

人线粒体核糖体蛋白L41(MRPL41)ELISA试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被兔脂肪酸合成酶（FAS）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔脂肪酸合成酶（FAS）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

哺乳动物线粒体核糖体(mitochondrial ribosome,mitoribosome)在漫长的进化阶段经过一系列的结构重组,rRNA比例降低,新增了部分线粒体核糖体蛋白(mitochondrial ribosomal proteins,MRPs),成为蛋白含量最丰富的核糖体.所有MRPs均为核基因编码,在细胞质中合成,再转运到线粒体,与线粒体基因(mitochondrial DNA,mtDNA)编码的两种rRNA结合。mtDNA除编码tRNA和rRNA外,还编码组成线粒体呼吸链复合体的13种蛋白质。

由于线粒体核糖体负责翻译这13种蛋白,MRPs和其他翻译工具的突变和缺陷可造成线粒体的相关疾病.构成核糖体的蛋白质。大肠杆菌核糖体蛋白的初级结构均被确定。大肠杆菌核糖体的30S亚基含S1—S21共21种蛋白质，50S亚基含L1—L31共31种蛋白质。这些蛋白质已被全部分离纯化。分子量约1万到3万。除S6、L7、L12之外全是碱性蛋白质。这些蛋白质是免疫学上独立的蛋白质，只有L7、L12显示出相互交叉反应。已知L7与L12是同一蛋白质，L7的N末端被乙酰化。已经确定了几种蛋白的一级结构。

机能已经明确的蛋白质如下述：S1：与蛋白质合成的i因子（干扰因子）和Qβ复制酶的亚基Ⅰ为同一物质，可与mRNA结合；S4：ram（核糖体的双关性ribosomal ambiguity）基因的产物；S5：SPc〔壮观霉素（Spectinomycin）抗性〕基因的产物；S12：str（链霉素抗性）基因的产物；L7、L12：有和多肽链延长因子Tu及G间的相互作用，也有和起始因子和终止因子的相互作用。L11：肽基转移酶。

应用^[8][9]

人线粒体核糖体蛋白L41(MRPL41)ELISA试剂盒可用于线粒体核糖体蛋白S5(MRPS5)对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响研究：

随着分子生物学技术的发展,人们发现癌基因、抑癌基因、小分子RNA等均可参与膀胱癌的发生与发展,然而由于分子特异性差靶向基因治疗并未取得良好的疗效,因此人们亟待发现新的特异的诊疗靶标。

膀胱癌的发生机制非常复杂,包括癌基因c-Myc、h-ras、EGFR、HER2等的激活和抑癌基因p21、p53、Rb、p16ink4a/p19ink4b等的失活,近年来的研究发现某些线粒体DNA和能量代谢相关的蛋白也能参与肿瘤的发生和发展,如线粒体蛋白质翻译延伸因子Tu(TUFM)、细胞色素B(Cytb)、线粒体DNA亚基ND6等,这也使得线粒体与肿瘤的关系研究受到极大关注;同时研究也证实线粒体功能异常是恶性肿瘤的一大特点,这不仅归功于癌基因/抑癌基因的调控,还与肿瘤组织内缺氧微环境相关。

缺氧普遍存在于实体肿瘤甚至血液系统肿瘤中,它能够调控线粒体的结构和功能,导致线粒体基因的功能改变,从而影响肿瘤细胞的能量代谢及生物学行为。线粒体核糖体蛋白S5(mitochondrial ribosomal protein S5,MRPS5)属于真核细胞线粒体核糖体28S小亚基成员,位于2p11.2-q11.2,含430个氨基酸,分子量48KDa,主要功能是参与合成线粒体氧化磷酸化的13种蛋白。

最近的研究发现MRPS5通过线粒体能量代谢障碍途径调控线虫及小鼠的寿命。已知衰老是肿瘤发生的易感因素,如膀胱癌发病率随年龄增加而增加;且长寿调控基因Sir2、daf-2、lin2、dct2、nnt-1等均参与肿瘤的发生和发展。同时,前已述及线粒体结构异常或功能障碍是肿瘤的重要特征,而mrps5作为线粒体结构组分且通过线粒体机能障碍途径参与调控动物的寿命,我们由此推测它可能与肿瘤的生物学行为密切相关。

参考文献

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