线粒体分离和线粒体酶提取试剂盒

线粒体分离和线粒体酶提取试剂盒

试剂一：50ml×1瓶，-20℃保存；试剂二：10ml×1瓶，-20℃保存；试剂三：10ml×1瓶，-20℃保存；试剂四：1ml×1支，-20℃保存；提取步骤

1、准确称取约0.1g组织或收集约500万细胞，加入1ml试剂一和10ul试剂四，用冰浴

匀浆器或研钵研磨。

2、4℃600 g离心5min。

3、弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，4℃11000 g离心10min。

4、上清液即胞浆提取物，可用于研究线粒体蛋白向胞浆的释放。

5、沉淀为完整线粒体。含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能。可用于线粒体的生理功能等方面的研究。

6、在沉淀中加入200ul试剂二和2ul试剂四，超声波破碎（冰浴，功率20％或200w，超声3秒，间隔10秒，重复30次），可用于线粒体酶活性测定。

7、在沉淀中加入200ul试剂三和2ul试剂四，超声波破碎（冰浴，功率20％或200w，超声3秒，间隔10秒，重复30次），可用于线粒体蛋白浓度测定。