5-氮杂胞苷

阿扎胞苷 (azacitidine)，化学名为 1-(β-D-呋喃核糖基 )-4- 氨基-1,3,5-三嗪-2(1H)-酮，又名5-氮杂胞苷、氮杂胞苷，商品名维达扎(Vidaza)，为白色针状结晶；是由美国Pharmion公司研发的DNA甲基转移酶抑制剂，2004年7月首次在美国上市；是作用于S期的细胞周期特异性药，能迅速磷酸化并渗入RNA(核糖核酸) 和DNA( 脱氧核糖核酸) 通过破坏核酸顺利翻译为蛋白质，而抑制蛋白质的合成，还可通过抑制乳清酸核苷酸脱羧酶而影响嘧啶的合成；临床上主要用于治疗骨髓增生异常综合征，包括难治性贫血、难治性贫血伴有环形铁粒幼细胞增多，如同时伴有中性粒细胞减少症、血小板减少症或需要输血、难治性贫血伴有原始细胞增多、难治性贫血伴有原始细胞增多–转变型和慢性骨髓单核细胞性白血病5种亚型。 本品为白色、类白色 固体,可溶于二 甲基亚砜,微溶于乙醇:水 (50:50 )、丙二醇、聚乙二醇;略溶于水、饱和辛醇水溶液、5 % 葡萄糖注射液、N一甲基一2一吡咯烷酮、0.9% 氯化钠注射液和 5% 聚山梨酯 80 水溶液;不溶于丙酮、乙 醇和甲基乙酮。 1.(1)N-三甲基硅基-4-三甲基硅基氧基-2-胺-1,3,5-三嗪（中间体 I）的合成
向 5 L 四口瓶中加入 HMDS 1 L，5-氮杂胞嘧啶 200 g，硫酸铵 20 g，加热回流 24 h，体系变为澄清溶液，降温至 60 ℃，加入 1,2-二氯乙烷 2 L至 80 ℃，搅拌反应 8 h，反应完毕，冷却降温至 5～10 ℃，备用。
(2)1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-4-氨基-1,3,5-三嗪-2(1H)酮（中间体 II）的合成
向上一步的反应体系中加入四乙酰核糖680g，缓慢滴加三氟甲磺酸三甲基硅酯200mL，室温反应12h，将反应液倒入冰水混合物中，用氢氧化钠溶液调 pH 值至 7～8，甲基叔丁基醚萃取3次，每次600mL，有机相用饱和食盐水洗涤2次，每次300mL，合并有机相，浓缩，得黄色黏稠状物900g。HPLC 测得的质量分数为94.9%。
(3)阿扎胞苷的合成
将上述黏稠状物用 2 L 甲醇转移至 3 L 四口瓶中，加入新鲜制备的甲醇钠30g，室温搅拌过夜，抽滤，得白色固体272g，熔点228～230 ℃，用吡啶重结晶得白色固体256g。

图1为阿扎胞苷的合成路线
2.(1)中间体2的制备
将六甲基二硅胺7.5L(35.3mol) ，5-氮杂胞嘧啶 ( 中间体 1) 500.0g(4.5mol) 和硫酸 铵13.0g( 0.1mol) 置于反应瓶中，机械搅拌，升温。保持反应液的温度140～145℃ 过夜。次日将反应液的温度降至70℃左右，减压浓缩得到中间体 2类白色固体1050.0g，收率92%。中间体2不经纯化直接用于下一步的反应。
(2)中间体4的制备
将上一步得到的中间体 2，四乙酰基呋喃核糖( 中间体 3) 470. 0g ( 1. 5mol) 和二氯甲烷3.0L 置于反应瓶中搅拌。10min内加入三氟甲磺酸三甲基硅酯380.0g (1.7mol),此过程保持反应液温度不超过25℃。室温搅拌10min后，升温至50～55℃并保持此温度2h，中间体3基本反应完毕。将反应液倒入6.0L含有碳酸钾500.0g(3.6mol)的冰水中，剧烈搅拌10min，析出胶状固体，铺硅藻土过滤。滤液用二氯甲烷 (5.0L ×3)提取，合并有机相，用盐水3.0L洗涤，分液。水相用二氯甲烷5.0L反提。合并有机相，用无水硫酸镁1.5kg干燥，过滤，并加入硅胶1.5kg 浓缩将溶剂完全拉干。柱层析: 流动相先为乙酸乙酯，后为V(乙酸乙酯)∶V(甲醇) =20∶1溶液。得360.0g 中间体4，收率 55% ( 以中间体3计算) 。
(3)阿扎胞苷的制备
将 360.0g(0.8mol)中间体4溶于含有甲醇钠10.0g(0.19mol)的甲醇溶液3.3L中，搅拌溶清，30min后析出大量固体。搅拌48h，HPLC检测原料反应完全(原料停留时间=16.3min，产物停留时间=9.6min，色谱柱: C18，4.6mm×150mm;流动相:甲醇/水，甲醇0min (30% )～15min(60%) ，运行40min)。过滤，固体用甲醇1.0L洗 涤，70℃条件下真空干燥过夜，得阿扎胞苷成品。

图2为阿扎胞苷的合成路线 阿扎胞苷通过使DNA减少甲基化过程和对骨髓异常造血细胞产生直接的细胞毒性,而发挥其抗肿瘤作用。体外研究表明,本品在最大程度抑制D NA 甲基化时的浓度,不会严重阻碍DNA 合成。甲基化过低现象可以使与细胞分化和增殖密切相关的基因恢复正常功能。而本品的细胞毒作用可引起快速增殖细胞的死亡,包括那些失去正常机制控制的癌细胞,而非增殖细胞对本品则相对不敏感。
有关阿扎胞苷的概述、理化性质、制备方法、药理作用、应用等是由Chemicalbook的丁红编辑整理。（2015-12-21） 本品可能经肝脏代谢，是否受微粒体酶抑制剂和诱导剂的影响未知。本品在体外浓度为1~100μmol·L-1时不会诱导CYP1A2,2C19 和 3A4 /5，对细胞色素P450 酶抑制的可能性未知经 5 例病人静脉给予同位素标记药物后测定发现，原形药物及其代谢产物的累积尿排泄率为 58 %，粪便中不到1%。静脉注射和皮下注射后总放射活性的消除半衰期约4h。 本品用于治疗骨髓发育不良综合征的下列亚型：难治性贫血 ( RA)、环形铁粒幼细胞性难治性 贫血(RARS) ( 伴有中性粒细胞减少或血小板减少或需要输血 )、难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)、难治性贫血伴原始细胞增多转变型(RAEB-T) 和慢性粒一单核细胞白血病(CMMoL)。 常见恶心、贫血、血小板减 少、呕吐、发热、白细胞 减少、腹泻、乏力、注射部位疼痛及红斑、便秘、中性粒细胞减少、癖斑、咳嗽、头痛、眩晕、关节痛、厌食、咽炎等。少见血清肌醉增高、肾衰竭、肾小管酸中毒、低血钾、肝昏迷、呼吸困难、寒战、肢体疼痛、背痛、咽 炎、水肿、胸痛、腹痛、皮疹、焦虑、心衰等。 1.本品与中性粒细胞和血小板减少有关，部分病人因血小板减少、中性粒细胞减少和白细胞减而减量或停药。
2.本品及其代谢物主要经肾脏排泄，肾功能不全病人使用本品时毒性较大；对严重肝功能不全者具有潜在的肝毒性，因此，每个疗程前和用药期间密切检查血象和肝肾功能。
3.该药是否从乳汁中排泄尚不了解，接受本品治疗 的妇女不宜进行哺乳。
4.动物实验证明本品可致肿瘤、致死胎,孕妇使用本品时胎 儿可能受到伤害。妊 娠期用药安 全性分级为D 级。使用本品期间，建议妇女避 免怀孕。因本品会影响精子的活力，男性病人也应采取避孕措施。
5.如果不慎将本品溅落到皮肤上，立即用大量的水冲洗。
6.本品溶解后必须在lh 内使用。如果不立即使用，则应放人冰箱冷藏 (2~8 ℃)，冷藏时间不超过8 h。从冰箱取出后在室温放置30min方可使用。为了避免混悬液在注射器内沉积，注射前应将注射器轻摇 30s。
7.已知对本品或甘露醇过敏者、晚期恶性肝癌患者禁用。 本品为由微生物Streptoverticillium ladakanus所产生的嘧啶核苷类似物，也可用化学方法合成。是作用于S期的细胞周期特异性药，能迅速磷酸化并掺入RNA和DNA通过破坏核酸顺利翻译为蛋白质，而抑制蛋白质的合成。还可通过抑制乳清酸核苷酸脱羧酶而影响嘧啶的合成。 抗代谢药。主要适应症是对常规治疗无效的急性髓性白血病。亦用于乳腺癌、黑色素瘤、肠癌等。毒性主要表现为白细胞减少、血小板减少和贫血。恶心和呕吐为常见的不良反应，可通过长时间持续输注使症状改善，或在治病前24h至48h用止吐剂。其他毒性作用为腹泻、神经肌内障碍、发热、低血压和皮疹。制剂在用前3-4h新鲜配制。 一种强效生长抑制剂及细胞毒素剂，抑制 DNA 甲基转移酶，一种基因表达、基因激活和沉默的重要调节机制；制癌助剂，具有弱抗体活性(革兰氏阳性)；用于研究在DNA甲基化过程中，DNA合并分子效应 一种潜在的生长抑制因子和细胞毒素载体；抑制DNA甲基化转移酶，该酶是一种重要的调控基因表达、基因激活和基因关闭的机关。 该因子引起DNA去甲基化或半去甲基化，允许转录因子结合到DNA上，重新激活肿瘤抑制基因。 有毒物品 高毒 口服-小鼠 LD50: 572 毫克/公斤; 腹腔-小鼠 LD50: 68 毫克/公斤 可燃; 燃烧产生有毒氮氧化物烟雾; 病人用药副作用: 恶心,呕吐,腹泻,白细胞减少 通风低温干燥; 与库房食品原料分开存放 干粉,泡沫,沙土,二氧化碳, 雾状水